NCI-H82人小细胞肺癌贴壁细胞系

NCI-H82细胞是1978年一名患有小细胞癌症的41岁男子的胸腔积液中建立；40岁白人男性的肺中分离的上皮样细胞系 1） 来源：人 来源于转移灶：胸腔积液
2） 形态：上皮样、悬浮成团 NCI-H82人小细胞肺癌贴壁细胞系通常用于研究小细胞肺癌的发生、发展和治疗。这些细胞系可以提供一个体外模型，用于评估新的抗癌药物的疗效，以及研究肿瘤细胞的生物学特性和分子机制。 1.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；3.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

NCI-H82人小细胞肺癌贴壁细胞系的生长特征为悬浮成团，使用时请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。

NCI-H82人小细胞肺癌贴壁细胞系细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

人源（Homo sapiens） 肺（Lung） 悬浮生长（Suspension） 40 岁（40 years） 表皮细胞（Epithelial） 癌症（Carcinoma）

NCI-H82人小细胞肺癌贴壁细胞系细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。