热敏UDG酶活性检测的常用策略
尿嘧啶DNA糖基化酶 (UDG) 是一种关键的DNA修复酶, 有助于保持基因组的完整性.UDG特异性移除DNA中的尿嘧啶 (U) 碱基, 产生无嘌呤/无嘧啶 (AP) 位点用于下游的修复过程.UDG活性的异常能导致修复过程紊乱和基因突变, 最终导致相关疾病, 包括淋巴瘤、布卢姆综合症和人类免疫缺陷病.因此, 检测UDG活性是一种候选工具用于生物医学研究和疾病预后.
2019-12-31
热敏UDG酶的应用
热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白,又称南极热敏UDG。该UDG酶能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高 pH 下,极易水解断裂。该酶对RNA无活性,主要用于PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热,经95℃10min处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,导致含有dU碱基的PCR产物的降解。
2019-12-31
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