CDNA文库构建新闻专题

cDNA文库构建是将mRNA在体外反转录成cDNA，与适当质粒载体连接后转化受体菌，进行繁殖扩增。最终获得包含组织或细胞全部mRNA信息的cDNA克隆群体。cDNA文库构建经典方法是用Oligo(dT)作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的cDNA加上适当的连接接头，连接到适当的载体中获得文库。其基本步骤包括：RNA的提取(例如异硫氰酸胍法，盐酸胍—有机溶剂法，热酚法等等，提取方法的选择主要根据不同的样品而定)，要构建一个高质量的cDNA文库，获得高质量的mRNA是至关重要的，所以处理mRNA样品时必须仔细小心。