
Y187感受态细胞的应用
Y187感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating操作,Transformationmarker为:trp1,leu2,报告基因为:lacZ,MEL1,经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μgDNA。Y187-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:pGBKT7和pGADT7。质粒pGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒pGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。
2020-10-18
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