小鼠结肠平滑肌细胞试剂盒的应用

背景^[1-6]

小鼠结肠平滑肌细胞试剂盒适用于分离培养小鼠的结肠平滑肌细胞,可以程度地降低所培养的成结肠原代细胞中成纤维细胞的含量。小鼠结肠平滑肌细胞试剂盒包含：（1）OptiTDSTM小鼠结肠平滑肌细胞组织解离液（3×1ml）（2）小鼠结肠平滑肌细胞组织处理缓冲液（100ml）（3）FibrOutTM小鼠结肠平滑肌细胞。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。

平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M”，将小肠包围在内。结肠的直径自其起端6cm，逐渐递减为乙状结肠末端的2.5cm，这是结肠肠腔最狭细的部位。

平滑肌细胞又叫平滑肌纤维，系构成平滑肌的纤维状长细胞。由于平滑肌所分布的部位不同，平滑肌细胞的长度很不一致，在小血管壁上的平滑肌细胞长度仅有20μm左右，妊娠期子宫壁平滑肌细胞可长达500μm，位于一般器官平滑肌细胞的长度约200μm左右，此细胞的宽度在7μm以内。

结肠平滑肌细胞分离自结肠组织，主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。人结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。

结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。

应用^[7][8]

小鼠结肠平滑肌细胞试剂盒可用于高糖对大鼠结肠平滑肌细胞生存及合成内源性SCF的影响：

糖尿病胃肠动力障碍是糖尿病（diabetes mellitus,DM）的慢性并发症之一，包括糖尿病胃轻瘫（diabetic gastroparesis,DGP）及结肠动力障碍等，严重影响患者的生活质量和血糖的控制。研究证实该病与胃肠自主神经、Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal,ICC）、平滑肌细胞（smooth muscle cells,SMCs）病变、高血糖及激素分泌异常有关。在DM病人及动物模型的胃肠组织中发现SMCs萎缩、超微结构破坏、纤维增生、甚至出现凋亡、坏死的现象；并且伴有SMCs的收缩及合成蛋白功能下降。

已知MAPK-ERK及PI3K-AKT通路是调节胃肠SMCs增殖的重要途径，bcl-2家族介导的线粒体凋亡通路则是调节细胞早期凋亡的重要途径。另有学者认为，DM胃肠动力障碍是一种胃肠神经肌肉的营养障碍，营养因子缺乏在细胞损伤中有不可或缺的作用；胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor1,IGF-1）是胃肠道SMCs生长、增殖、分化的重要营养因子。

前期研究表明IGF-1可调节胃肠SMCs表达干细胞因子（stem cell factor,SCF），对胃肠道起搏细胞ICC具有保护作用。

参考文献

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[8]徐新寓.高糖对大鼠结肠平滑肌细胞生存及合成内源性SCF的影响[D].南京医科大学,2012.