大鼠前列腺上皮细胞的应用

背景^[1-2]

大鼠前列腺上皮细胞分离自前列腺组织；前列腺（Prostate)是雄性特有的性腺器官；前列腺是不成对的实质性器宫，由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子，底朝上，与膀胱相贴，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面贴耻骨联合，后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过，扼守着尿道上口，所以，前列腺有问题时，排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的，具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是构成精液主要成分；作为内分泌腺，前列腺分泌的激素称为“前列腺素”。

生理功能^[3-6]

前列腺上皮细胞与前列腺的功能关系密切，上皮细胞的损伤是前列腺炎的主要病症，重度的前列腺炎患者的前列腺液内可检测到脱落的上皮细胞，这是上皮细胞损伤的标志。炎症发生时，与炎症相关的一些炎症因子可能发生变化。因此，体外培养前列腺上皮细胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基础。前列腺主要特征如下：①前列腺结构和功能活动均受雄性激素的调控；②基底细胞主要表达高分子量细胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮细胞可分化成管腔上皮细胞；③前列腺上皮细胞的培养为研究前列腺的许多重要特性以及化学和激素性致癌作用提供了机会。大鼠前列腺上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、后胶原酶-胰蛋白酶联合消化并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

应用^[7][8]

用于性激素受体在良性前列腺增生症中的发病机制研究

良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia,BPH)是一种常见于老年男性的由前列腺移行区上皮和基质良性增生造成膀胱出口梗阻,从而引起患者一系列下尿路症状的良性疾病,其发病率与年龄呈正相关。目前我国即将进入老龄化社会,由BPH带来的卫生经济学压力更加严峻。目前认为BPH是一种由多因素参与的具有复杂发病机制的疾病,到目前为止其确切发病机制及病因仍不清楚。于是明确BPH的确切发病机制将有可能发现更加有效的预防及治疗方案,对提高老年男性的生活质量、减少社会医疗保障负担具有重要的意义。

研究目的:本研究针对性激素受体包括雄激素受体(AR)、雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)和孕激素受体(PGR)在BPH中的可能机制做一探索性研究,期望能找到一个突破口。鉴于BPH的可能发病机制的多因素性,在明确上述性激素受体在BPH组织中的确切表达变化后,拟从可能参与性激素受体m RNA调控的micro RNAs、可能受性激素受体调控且与细胞增殖或凋亡相关的细胞因子和生长因子、代谢综合征与性激素受体的相关性等多方面进行探索,在研究过程中根据实验发现结果及时调整方案,为进一步深入研究并揭示性激素受体在BPH中的确切发病机制提供一定的思路。通过联合丙酸睾酮和苯甲酸雌二醇诱导去势SD雄性大鼠建立大鼠BPH模型。

联合使用IHC、qRT-PCR和WB的方法确定性激素受体包括AR、ERα、ERβ和PGR在BPH组织中较正常前列腺组织的表达差异,然后采用同样方法检测大鼠BPH模型组织中这些受体的表达差异变化。证实了BPH组织中AR和PGR的表达上调以及ERα的表达下调。推测在BPH中AR和PGR具有诱导疾病起病、促进疾病进展的作用,而ERα则具有抑制作用。激素诱导大鼠BPH模型与人BPH中雄激素/AR通路的活化机制具有差异性。

参考文献

[1]Burden of male lower urinary tract symptoms(LUTS)suggestive of benign prostatic hyperplasia(BPH)–focus on the UK[J].Mark Speakman,Roger Kirby,Scott Doyle,Chris Ioannou.BJU Int.2015(4)

[2]Functional significance of aberrantly expressed microRNAs in prostate cancer[J].Yusuke Goto,Akira Kurozumi,Hideki Enokida,Tomohiko Ichikawa,Naohiko Seki.Int J Urol.2015(3)

[3]Metabolic syndrome and benign prostatic enlargement:a systematic review and meta‐analysis[J].Mauro Gacci,Giovanni Corona,Linda Vignozzi,Matteo Salvi,Sergio Serni,Cosimo De Nunzio,Andrea Tubaro,Matthias Oelke,Marco Carini,Mario Maggi.BJU Int.2015(1)

[4]Labda‐8(17),12,14‐trien‐19‐oic Acid Contained in Fruits of Cupressus sempervirens Suppresses Benign Prostatic Hyperplasia in Rat and In Vitro Human Models Through Inhibition of Androgen and STAT‐3 Signaling[J].Vikas Verma,Vikas Sharma,Vishal Singh,Rajeev Kumar,Mohammad F.Khan,Anil K.Singh,Rolee Sharma,Kamal R.Arya,J.P.Maikhuri,Diwakar Dalela,Rakesh Maurya,Gopal Gupta.Phytother.Res..2014(8)

[5]Metabolic syndrome induces inflammation and impairs gonadotropin-releasing hormone neurons in the preoptic area of the hypothalamus in rabbits[J].Annamaria Morelli,Erica Sarchielli,Paolo Comeglio,Sandra Filippi,Linda Vignozzi,Mirca Marini,Giulia Rastrelli,Elena Maneschi,Ilaria Cellai,Luca Persani,Luciano Adorini,Gabriella B.Vannelli,Mario Maggi.Molecular and Cellular Endocrinology.2014(1)

[6]Benign Prostatic Hyperplasia:A New Metabolic Disease of the Aging Male and Its Correlation with Sexual Dysfunctions[J].Giovanni Corona,Linda Vignozzi,Giulia Rastrelli,Francesco Lotti,Sarah Cipriani,Mario Maggi,Antonio Aversa.International Journal of Endocrinology.2014

[7]miR-126 in human cancers:Clinical roles and current perspectives[J].Faeza Ebrahimi,Vinod Gopalan,Robert Anthony Smith,Alfred King-Yin Lam.Experimental and Molecular Pathology.2013

[8]宋灵敏.性激素受体在良性前列腺增生症中的发病机制研究[D].第三军医大学,2016.