左氧氟沙星去羧基杂质的检测研究与毒性研究

前言

左氧氟沙星(Levofloxacin)与氧氟沙星(Ofloxacin)均为化学合成的广谱抗菌药,其中氧氟沙星为消旋体,而左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋体，其抗菌作用是氧氟沙星的2倍。国内已上市的左氧氟沙星、氧氟沙星制剂主要有片剂、胶囊剂、注射剂和滴眼剂等,批准文号有上千个,临床应用均非常广泛。目前文献报道多为左氧氟沙星以及氧氟沙星有关物质检测方法以及杂质制备、手性拆分方法等,但关于杂质的含量研究报道较少。左氧氟沙星去羧基杂质为左氧氟沙星的酸降解杂质，其消旋体-去羧基氧氟沙星(CAS:123155-82-8)收载于《欧洲药典》增补本8.7(为氧氟沙星杂质B)。目前国内外均无左氧氟沙星去羧基杂质对照品提供,在左氧氟沙星质量研究、检验过程中只能使用左氧氟沙星去羧基杂质进行替代。

检测研究

刘斐等人建立左氧氟沙星去羧基杂质的高效液相色谱含量测定方法。方法采用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂,流动相为醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈(85:15),流速为1.0mL·min-1,检测波长为282nm,柱温为40℃。结果，去左氧氟沙星去羧基杂质进样量为0.86～3.44μg时与峰面积呈良好线性关系(r=0.9995),最低检出量为3ng,重复性试验的RSD(n=6)为0.39％。该方法准确、灵敏、可靠,专属性强,可用于去羧基左氧氟沙星的含量测定，同时通过制备得到左氧氟沙星去羧基杂质纯品，经检测其纯度为99.1%，符合杂质对照品的纯度要求[1]。

毒性研究

王维剑对左氧氟沙星的两个目标杂质的基因毒性分析，其中，左氧氟沙星去羧基杂质，虽然含有基因毒性警戒结构，但是通过Ames试验结果为阴性，ICH M7规定:对于发现存在警示结构的杂质，可以采用充分的控制措施，或者对该杂质单独进行细菌诱变测试(Ames)。如果Ames测试结果为阴性，则认为该杂质没有基因毒性，不需要载做进一步的试验。故根据ICH M7指导原则，可以将左氧氟沙星去羧基杂质作为非基因毒性杂质控制[2]。

参考文献

[1] 刘斐,张珏,王维剑. HPLC法测定去羧基左氧氟沙星的含量[J]. 药学研究,2016,35(8):463-465. DOI:10.13506/j.cnki.jpr.2016.08.007.

[2] 王维剑. 药品杂质控制与评价关键技术研究[D]. 济南:山东大学,2016. DOI:10.7666/d.Y3036105.