MAGE-1抗体在多癌种当中的检测方法学

黑色素瘤抗原基因家族最初是在黑色素瘤细胞中被细胞毒性T淋巴细胞识别到的，其产物属肿瘤-睾丸抗原，正常情况下仅表达于睾丸、胎盘等生殖相关组织，但是，在多数恶性肿瘤中却被重新激活。在肿瘤表现为高表达，而正常组织则低表达，这让MAGE-1既是免疫治疗的候选靶点，也是肿瘤细胞检出的分子标志^[2]。MAGE-1抗体是针对黑色素瘤抗原1（MAGE-1）的抗体，因此在肿瘤诊断、免疫治疗等领域有重要价值。

MAGE-1抗体在食管癌中的应用

采用RT-PCR检测了30例食管癌组织及相应癌旁正常组织，MAGE-1的表达阳性率为43%（13/30），癌旁正常黏膜中未见表达。研究者进一步扩增出MAGE-1 cDNA全长序列，酶切后与pET-30a(+)载体连接，测序与GenBank报道一致^[2]。该研究指出，MAGE-1抗原具有多个HLA-I类分子限制性的CTL识别表位，因而被视为较安全的多肿瘤治疗性疫苗共同免疫原^[2]。若以MAGE-1抗体对同一批食管癌蜡块做免疫组化染色，即可判断43%的转录阳性率能否在蛋白层面复现。

MAGE-1抗体在胃癌与慢性胃炎活检中的分层判读

对36例胃癌组织、相应癌旁正常黏膜以及37例慢性胃炎胃镜活检组织进行了检测。胃癌组织中MAGE-1阳性率明显高于癌旁黏膜组织慢性胃炎活检组织。MAGE-1与MAGE-3双阳性者比例由高到低。肿瘤组织中MAGE-1的表达与浸润深度、分化程度相关，与病理分期及淋巴结转移无关^[3]。作者提出，癌旁黏膜可能属于癌旁移行黏膜范围。说明抗体在良性胃炎黏膜的低水平表达与癌组织的高水平表达之间给出了可区分的信号强度。

MAGE-1抗体在肝癌多标志物联合检测中的定位

研究人员收集2003年至2005年经病理证实的86例肝细胞癌组织（男性51例、女性35例），以荧光定量RT-PCR检测MAGE-1、MAGE-3与AFP mRNA，阳性率逐渐升高^[1]。所有病例至少表达其中一种mRNA，故三者联检可弥补部分患者AFP mRNA阴性的不足^[1]。对MAGE-1抗体而言，蛋白水平的MAGE-1检出可能成为补充证据。

MAGE-1抗体使用前必须完成的靶点辨析

MAGE-1在文献中常与MAGE-A1互换使用，两者指同一基因（定位于Xq28），区别在于MAGE-A1为正式命名，MAGE-1为早期文献沿用名。此外，MAGE-A家族成员之间序列同源性较高，MAGE-1与MAGE-3即分属不同成员，其编码蛋白存在相似区段。因此选择MAGE-1抗体时，建议先确认免疫原对应的表位是否落在MAGE-A1特异区段，并核查是否与其他成员交叉。验证可参照同类研究，比如以表达MAGE-1的阳性细胞（如A375）与不表达的阴性细胞（如ECV-304、HMrSV5）配对做免疫染色或Western blot，避免把家族交叉信号误读为MAGE-1特异性表达。此外，睾丸与胎盘的生理性表达意味着涉及生殖系统样本时，MAGE-1抗体的判读需格外谨慎。

参考文献

[1] 刘宁, 梁寒, 李强, 等. MAGE-1 MAGE-3及AFP基因在肝癌组织中的表达[J]. 中国肿瘤临床, 2007, 34(9): 493-495.

[2] 彭良平, 王贵齐, 冉宇靓, 等. MAGE-1基因在人食管癌中的表达及基因克隆[J]. 免疫学杂志, 2001, 17(2): 97-99.

[3] 陈雪华, 刘炳亚, 张冬青, 等. MAGE-1、MAGE-3基因在胃癌和胃活检组织中的表达及意义[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2004, 20(3): 310-313.