明胶包被培养器皿的使用方法

背景及概述^[1]

培养器皿又称彼得立皿或陪替氏皿。由科赫的学生Petri发明，故名。一种圆形、浅层、平底、垂直边、有盖的玻璃或塑料皿，形状有大有小，但以直径9cm者最为常用。皿盖与皿底的外形几乎完全相同，惟直径稍大而已。有时为避免玻璃皿盖上的冷凝水滴下而影响正常培养(如测定抗生素效价)，也有改用素烧瓷圆板做皿盖的。培养皿是微生物学实验室中最常用的固体培养(平板培养)器皿。明胶是由胶原水解后得到的水溶性蛋白多聚体。明胶包被培养器皿能促进多种细胞的贴壁和生长，可用于培养正常或转染细胞，如血管内皮细胞、心肌细胞、胚胎干细胞、胰岛细胞等，明胶包被培养器皿具有以下特点：①　能促进多种细胞的贴壁；②　预包被的明胶层节省实验准备的时间和费用；③　批次间的稳定性保证实验结果的可重复性。

使用方法^[1]

明胶包被培养器皿使用方法如下：

1.配置0.1%的明胶溶液：

1）准确称量0.1g的明胶，溶于mp（过热蒸汽）的三蒸水中，放进56℃的水浴箱中进行充分溶解；

2）使用0.22um的滤器对明胶溶液进行过滤除菌。过滤的作用，一来是可以除菌，二来是除去溶液中没有溶解的颗粒，这样接下来的铺板才能更加均匀。

3）除菌完毕后，将明胶溶液放在培养瓶中用封口膜封好，无菌存储备用。

2.包被培养皿：

1）取消毒过的干净培养皿，加入适量的0.1%的明胶，以没过整个底面之后再稍微加一点为宜。这个过程不能产生气泡，不然就会导致明胶铺的不均匀，甚至有些地方没有铺上，这样不利于细胞的贴壁；

2）加入明胶之后，将培养皿放置在超净台内30分钟，或者放置在37℃饱和湿度培养箱里20分钟；

3）吸干净明胶后，可直接使用，或在饱和湿度的培养箱中放30分钟，效果更佳。

主要参考资料

[1] 微生物学词典