亚甲基蓝染色液(1%)——从真菌镜检到消化道黏膜病变诊断的多场景应用

染色诊断是临床检验与内镜诊疗中最基础、最经济的辅助手段之一。亚甲基蓝（美蓝）是一种经典的阳离子噻嗪类染料，能够与组织蛋白、多糖等成分结合，兼具活体染色与常规细胞染色的双重属性。亚甲基蓝染色液(1%)因浓度适中、着色稳定、配制简便，在皮肤真菌检验与消化内镜黏膜染色中被广泛采用。近年来，多项临床研究从不同科室视角评价了该类试剂的应用价值。

在马拉色菌毛囊炎诊断中的应用

马拉色菌是马拉色菌毛囊炎的主要病原菌，常规KOH涂片镜检常因圆形均质脂肪滴与菌体混淆而难以获得满意结果。钟白玉等对100例马拉色菌毛囊炎患者的皮损标本同时进行真菌荧光染色、PAS染色和美蓝染色比较，结果显示美蓝染色阳性93例，与荧光染色（98例）、PAS染色（91例）的阳性率差异无统计学意义，且镜下菌体呈紫红色，背景中的脂滴、气泡不着色，易于鉴别^[1]。该研究使用的美蓝染色液与亚甲基蓝染色液(1%)同属亚甲基蓝类染料，操作时仅需在涂片上滴加1滴染液，染色1~2 min后水洗即可在普通光学显微镜下观察。较荧光染色无须特殊光源设备，较PAS染色省去氧化、复染等繁琐步骤。可见，亚甲基蓝染色液(1%)凭借操作简便、成本低廉、学习曲线短的优势，在皮肤科及基层检验中具有良好的适用性。

在上消化道内镜肠化生筛查中的应用

胃食管反流病（GERD）患者远端食管随机活检对特异性肠化生（SIM）的检出能力有限，染色内镜因此被寄予厚望。Duncan等对52例拟行内镜筛查的GERD患者，采用亚甲基蓝染色液(1%)行远端食管活体染色，并根据深染、淡染、未染色区域分别取样活检，结果显示27例（52%）出现染色，SIM总检出11例（21%），染色区域与组织学证实的SIM存在对应关系，在标本水平上，染色检测SIM的灵敏度为32.4%、特异度达85%，165份未染色标本中140份经病理证实不含SIM^[2]。该研究提示，亚甲基蓝染色液(1%)对SIM的识别具有较高特异性，染色阳性区可作为靶向活检的重要提示，但在缺乏肉眼可见柱状上皮化生表现时，单纯依赖染色作为筛查工具的价值有限，宜结合白光内镜表现与其他染色、放大技术综合判断。

在胃黏膜病变诊断中的应用

在消化道黏膜病变领域，染色内镜已成为提高早期病变检出率的重要手段。对396例高危患者于常规胃镜检查后进行醋酸联合亚甲基蓝染色，结果显示染色后低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及早期胃癌的检出率均高于常规检查，差异有统计学意义，常规检查检出的隆起型、平坦型、凹陷型病灶分别仅占染色检查检出的46.7%、62.2%和65.7%^[3]。其机制在于醋酸可去除表面黏液、增强腺管对比，继而喷洒亚甲基蓝染色液(1%)，使肠化生及异型增生上皮经异常细胞间连接吸收染料而呈蓝色，而正常黏膜几乎不着色，从而清晰勾勒病变轮廓，为靶向活检及内镜下切除范围判定提供依据。

试剂质量与规范操作的意义

从上述研究可以看出，染色结果的可重复性在很大程度上取决于试剂质量与操作规范。亚甲基蓝染色液(1%)作为商品化诊断试剂，其浓度准确性、染液稳定性、pH值及新鲜度直接影响着色效果。浓度过低则着色浅淡、易漏诊，浓度过高则背景染色过深、干扰判读，染色时间、喷洒量及冲洗时机同样需要标准化。因此，选用质量稳定、批次可控的亚甲基蓝染色液(1%)，并配套规范的操作流程与统一的判读标准，是保障其在真菌检验与内镜黏膜诊断中发挥价值的重要前提。

参考文献

[1] 钟白玉, 徐艳, 邓向芬, 等. 荧光染色、PAS染色和美蓝染色在马拉色菌毛囊炎诊断中的比较[J]. 实用皮肤病学杂志, 2018, 11(3): 149-150.

[2] DUNCAN M B, HORWHAT J D, MAYDONOVITCH C L, et al. Use of methylene blue for detection of specialized intestinal metaplasia in GERD patients presenting for screening upper endoscopy[J]. Digestive Diseases and Sciences, 2005, 50(2): 389-393.

[3] 桑华超, 章春燕, 盛红, 等. 内镜下醋酸联合亚甲基蓝染色对胃黏膜病变的诊断价值[J]. 中国乡村医药, 2013, 20(7): 52-53.