SLAMF7抗体的应用

背景^[1-6]

SLAMF7抗体是表达于NK细胞和免疫细胞亚群的活化受体。最早研究发现其参与天然杀伤细胞(NK细胞)黏附功能。与正常浆细胞相比，多种免疫细胞包括NK细胞、NK样T细胞、CD8+T细胞、活化单核细胞及树突状细胞均低表达SLAMF7。抗体与SLAMF7结合可以激活NK细胞和固有免疫。活化NK细胞可直接杀死肿瘤细胞。通过SLAMF持续活化NK细胞可能激活适应性免疫，并产生长期免疫力。

靶向信号淋巴细胞激活分子家族成员7（SLAMF7），也称为CS1，它是一种表达于骨髓瘤细胞表面的糖蛋白，同时也表达于自然杀伤细胞（NK cell）和浆细胞表面，在造血谱系分化细胞的特定免疫细胞亚群中也呈较低水平的表达。表面抗原CD319（SLAMF7）是多发性骨髓瘤中正常浆细胞和恶性浆细胞的强标记物。与CD138（传统的浆细胞标记物）相比，CD319/SLAMF7更加稳定，并且能够从延迟甚至低温保存的样品中强分离出恶性浆细胞。SLAMF7正作为免疫治疗多发性骨髓瘤的靶点被进行大量研究。

通过huLuc63抗体（Elotuzumab）诱导嵌合抗原受体（CAR）表达，来重置T细胞对SLAMF7的特异性，并且证明了无论是来源于患者的还是健康捐献者的SLAMF7-CAR T细胞均获得抗骨髓瘤活性。

研究人员还证实在未进行过治疗的患者和接受过蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂（IMiDs）治疗的复发性/难治性（R/R）患者的恶性浆细胞上，SLAMF7表达水平高且统一。在体外，SLAMF7-CAR T细胞可促使既往未治疗过的和R/R原发性骨髓瘤细胞快速溶解。除此之外，SLAMF7-CAR T细胞的单一管理可用于分辨小鼠移植瘤模型体内髓内和髓外的骨髓瘤。部分正常的淋巴细胞可表达SLAMF7，包括NK细胞、T细胞和B细胞。

通过SLAMF7-CAR修饰，CD8+和CD4+T细胞也可迅速获得并维持SLAMF7表型，并且可迅速扩展到治疗相关的细胞剂量。Tea Gogishvili等人对SLAMF7-CAR T细胞如何识别正常的淋巴细胞进行分析发现其诱导SLAMF7+/high NK细胞，CD4+和CD8+T细胞和B细胞选择性杀伤。重要的是，SLAMF7-CAR T细胞所诱导的细胞杀伤可保留每个细胞集的SLAMF7-/low的部分，并保护功能性淋巴细胞，包括病毒特异性T细胞。

应用^[7][8]

SLAMF7抗体可用于HPV16 E6潜在靶基因的筛选、鉴定及其在宫颈鳞癌中的表达研究：

高危型人乳头瘤病毒(high risk-human papillomaviruses,HR-HPVs),尤其是HPV16与宫颈癌等多种恶性肿瘤的发生与演进存在密切的关系。HPV16等HR-HPVs中的E6和E7癌基因持续表达为宿主细胞恶性转化和恶性表型维持所必需；其中,E6基因编码的E6蛋白具有促进细胞增殖、侵袭与转移的作用。研究显示,E6基因在人类基因组中无同源序列,而且仅存在于感染HPVs的细胞中。因此,E6为宫颈癌等HPVs相关肿瘤的治疗提供了理想靶点。

但是,以E6为靶点治疗方案均处于研究阶段。尽管HPV16E6诱导肿瘤发生与演进的分子机制已有较多报道,但其致癌机制复杂,报道存在差异。因此,深入研究HPV16E6的致癌机制,对探索HPV16相关肿瘤新的治疗方法具有重要意义。目的筛选并验证HPV16E6相关的潜在靶基因,并观察它们在HPV16阳性和阴性的宫颈鳞癌组织中的表达情况,以期为研究HPV16E6和筛选出的E6相关的潜在靶基因之间的调控关系及调控机制奠定基础,从而丰富HPV16的致癌机制,为其相关肿瘤治疗提供新靶点。

方法1.以课题组建立的转p-Genesil-E6shRNA真核表达重组质粒的HPV16阳性宫颈癌CaSki细胞(E6表达沉默)(实验组)和转p-Genesil-1质粒(含无关shRNA)的CaSki细胞(对照组)为研究对象,通过Agilent人基因组表达谱芯片技术,检测HPV16E6表达沉默后基因表达谱的变化。p-Genesil-E6-shRNA-CaSki细胞中SLAMF7的表达显著低于C33A细胞、SiHa细胞和p-Genesil-无关shRNA-CaSki细胞(P<0.01),C33A细胞中SLAMF7的表达表达显著低于SiHa细胞和p-Genesil-无关shRNA-CaSki细胞(P<0.01),而SiHa细胞和p-Genesil-无关shRNA-CaSki细胞中SLAMF7的表达差异无显著性(P>0.05)。

结论1.筛选并初步证明了MUC16、MMP3、SLAMF7、SERPINA3、ANXA10和CDH15可能是HPV16E6的潜在靶基因。2.进一步证明了TRAIL是HPV16E6的靶基因。3.为研究HPV16E6和筛选出的与E6相关的潜在靶基因之间的调控关系及调控机制奠定了基础。

参考文献

[1]Recent Advances in Design of Immunogenic and Effective Naked DNA Vaccines Against Cancer[J].Daniela Fioretti,Sandra Iurescia,Monica Rinaldi.Recent Patents on Anti-Cancer Drug Discovery.2014(1)

[2]YY1 and a unique DNA repeat element regulates the transcription of mouse CS1(CD319,SLAMF7)gene[J].Prachi Dongre,Stephen Mathew,Irina Akopova,Ignacy Gryczynski,Porunelloor Mathew.Molecular Immunology.2013(3-4)

[3]RNA interference can be used to disrupt gene function in tardigrades[J].Jennifer R.Tenlen,Shaina McCaskill,Bob Goldstein.Development Genes and Evolution.2013(3)

[4]The future of immunoglobulin therapy:An overview of the 2nd international workshop on natural antibodies in health and disease[J].Sylvia M.Miescher,Fabian K?sermann.Autoimmunity Reviews.2013(6)

[5]Egr-1 enhances drug resistance of breast cancer by modulating MDR1 expression in a GGPPS-independent manner[J].Weiwei Tao,Jun-Feng Shi,Qian Zhang,Bin Xue,Yu-Jie Sun,Chao-Jun Li.Biomedicine&Pharmacotherapy.2013(3)

[6]Targeting RNA splicing for disease therapy[J].Mallory A.Havens,Dominik M.Duelli,Michelle L.Hastings.WIREs RNA.2013(3)

[7]RNA Interference—A Silent but an Efficient Therapeutic Tool[J].Puthucode Venkatakrishnan Ramachandran,Savarimuthu Ignacimuthu.Applied Biochemistry and Biotechnology.2013(6)

[8]乔亚光.HPV16 E6潜在靶基因的筛选、鉴定及其在宫颈鳞癌中的表达[D].新乡医学院,2013.