人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒的实验原理与特异性

人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒是一种用于特异性地高灵敏地定量检测所有哺乳动物血清、血浆或细胞培养上清液中的睾酮的ELISA试剂盒。11-Ketodihydrotestosterone (11-KDHT)是一种雄性激素类固醇，在第三和第十七位分别含有一个酮基和一个羟基，它可通过多个反应步骤从胆固醇中生物合成，并在肝脏中转化为非活性代谢物。

图1 使用人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒是分析的参考示意图

实验原理

人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)呈负相关，用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度。[1]

特异性

人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒可检测样本中人的11-KDHT，且与其类似物无明显交叉反应。

注意事项

使用人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒需要严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏试剂。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体，整个过程中不要让微孔干燥时间过长。底物显色液应呈无色的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。人11-酮二氢睾酮(11-KDHT)ELISA试剂盒以外来源的重组蛋白可能会出现与本试剂盒抗体不匹配而不被识 别的情况。如果可能传播疾病，所有的样本都应管理好，按照规定的程序处理样本和检测装置。[1]

参考文献

[1] Andersson C R, et al. Comparisons between commercial salivary testosterone enzyme-linked immunosorbent assay kits[J]. Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation, 2017, 77: 582-586.