超敏ECL化学发光即用型底物

背景及概述^[1]

超敏ECL化学发光试剂盒，是一种基于鲁米诺的增强型化学发光(ECL)HRP 底物，是一款具有超高灵敏度的化学发光(ECL)底物，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出荧光，从而可以通过用X光片压片或CCD成像仪检测样品, 当底物与优化的抗体浓度和封闭缓冲液配合使用时，可检测到常规ECL底物无法检测的低丰度靶蛋白。

产品特点^[1]

1.用于辣根过氧化物酶(HRP)的化学发光底物

2.使用适当的一抗和二抗时，可在NC膜或PVDF膜上检测丰度为低皮克级的蛋白条带

3.所得信号的可定量检测范围跨越两个数量级

4.通过胶片或成像系统进行曝光，易于捕获图像

5.试剂盒组分能够在4℃条件下稳定放置一年

6.配方经过优化，可适用于浓度极低的抗体检测

7. 高信噪比，背景低

8. 发光迅速

9. 可在日光灯下进行发光操作

10. 灵敏度高：可检测皮克级抗原

11. 发光持续时间长，可进行反复曝光，进行结果优化，而不需重复试验检测

12.超敏化学发光检测试剂灵敏度高，节约一抗二抗抗体

使用方法^[1]

1. 制备工作液：将试剂平衡至室温，按A液和B液等体积混合至滴瓶或自备试剂瓶，例如1ml A液和1ml B液混合，混匀组成工作液即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准。每10cm²膜需要大约1 ml工作液。

2. 将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上，加上配好的发光底物工作液，确保工作液完全均匀覆盖在印迹膜上。

3. 将印迹膜与工作液孵育1-5分钟。

 注意：孵育的时间可以在暗室里观察，以判断是否进行后续胶片曝光。

4. 将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上，只要保鲜膜或透明的玻璃纸比较大可以不用吸除多余的工作液，轻轻赶出其间的气泡，再移至暗室内或固定至X片暗盒内。

5. 在暗室中取一张X胶片小心置于印迹膜上，或取X胶片置于暗盒内的印迹膜上；曝光5秒至1分钟，立即显影定影。

注意：根据其发光的强度， 缩短或延长X片的曝光时间（对微弱信号，曝光时间可延长至数小时）,或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。

6. 荧光成像仪（CCD）检测：将印迹膜放置到荧光成像仪内，按仪器说明书进行检测和记录化学发光图像。

注意事项^[1]

1.A液和B液吸取过程中必须更换移液器枪头，避免相互污染失效。

2.A液和B液混合为工作液后，需避免强氧化剂如次氯酸钠等对工作液的影响。

3.须确保试剂瓶干净，无微生物或其它试剂污染。

4.为了您的安全，请穿实验服并佩戴一次性手套。

其他应用^[2]

用于检测8-oxo-dG：将8-oxo-dG与抗8-oxo-dG抗体反应形成特异性结合物；向特异性结合物加入抗鼠-HR多聚物，使抗鼠-HR多聚物与所述特异性结合物反应形成8-oxo-dG、抗8-oxo-dG抗体和抗鼠-HR多聚物的三元复合物；然后向三元复合物中加入ECL化学发光底物，所述ECL化学发光底物在所述三元复合物的作用下发光；然后检测ECL化学发光底物的发光强度，根据发光强度计算待测物中8-oxo-dG的含量。

主要参考资料

[1] 超敏ECL化学发光即用型底物说明书

[2] CN201110095478.3 8-氧代脱氧鸟苷的检测方法