叶绿素 B的测定和性质

介绍

叶绿素 B的分子式为C₅₅H₇₀MgN₄O₆，外观为绿色晶体。它是光系统II（PSII）的重要组成部分，参与水的光解反应，产生氧气和质子。

叶绿素 B

提取

绿宝石甜瓜和菠菜样品，取可食部分经匀浆机匀浆后，储存于样品瓶中。黑米样品经高速粉碎机粉碎后，储存于样品瓶中，样品现用现制备。称取样品于50 mL离心管中，液体试样加入无水硫酸钠1 g，固体试样不需要加无水硫酸钠，然后加入0.1%BHT甲醇溶液15 mL，涡旋混匀，超声提取2 min，8000 r/min离心5 min，将上层溶液转移至150 mL旋转蒸发瓶内，重复提取3次，合并提取液于蒸发瓶内。将蒸发瓶接在旋转蒸发仪上，40 ℃水浴减压蒸馏，待瓶中萃取液剩下约2 mL时，取下蒸发瓶，立即用氮气吹至近干。用0.1%BHT甲醇溶液洗出蒸馏瓶中的组分，转移到5 mL容量瓶中，用0.1%BHT甲醇溶液定容。溶液过0.45 μm有机系微孔滤膜后，采用高效液相色谱仪测定。根据样品中叶绿素 A和叶绿素 B的含量进行稀释[1]。

荧光性质

在CCl4、和丙酮溶液中叶绿素 B自然光照后，荧光强度均会减弱，在自然光下放置同样的时间，在CCl4溶液中荧光强度减弱的程度要比在丙酮溶液中大，在丙酮溶液中相对较为稳定。原因是由于它在光照时会发生光解作用;溶剂介电常数越小，光解作用越大, 因此它在介电常数较小的CCl4溶液中最不稳定，光解较为完全。随着温度的升高，它的荧光强度从731a.u.变化到712a.u，荧光强度略有减小，可能是在恒温加热的过程中有一部分叶绿素 B发生了光解，但是总的来看，温度对叶绿素B的荧光强度影响轻微。荧光是第一激发态最低振动能级的电子向基态跃迁时产生的，在浓度较低的情况下，温度对于电子的跃迁没有产生明显的影响[2]。

参考文献

[1]孔凡华,赵玥,贾瑞勤,等.高效液相色谱法测定食品中叶绿素a和叶绿素b的含量[J].食品安全质量检测学报,2024,15(18):313-320.

[2]张怀斌,马丽英,李怀祥,等.不同条件下叶绿素B的荧光性质研究[J].枣庄学院学报,2009,26(02):73-75.