BHK-21/叙利亚仓鼠肾细胞系BHK-21的培养方法

背景及概述^[1-2]

肾细胞系又称聚集细胞，成群分布于昆虫体内具有排泄功能的细胞。起源于中胚层，位置因昆虫种类不同而异。位于背血窦内的称围心细胞。胞内常具有一个以上的核和丰富的内质网、膜泡和质膜内褶，具有吸收血淋巴中胶体颗粒进行中间代谢，以及贮存某些代谢废物的功能。

细胞培养方法^[2]

BHK-21细胞即叙利亚仓鼠肾细胞(BabyHamsterKidneycell，BHK-21或BHK21)，该细胞系于1961年由MacphersonIA、StokerMGP建系，源自5只未辨性别的1天龄仓鼠肾，广泛用于增殖病毒生产疫苗，如口蹄疫疫苗。原始的BHK-21细胞株为贴壁生长型的细胞，甘肃省动物细胞工程技术研究中心将其驯化成了可无血清全悬浮培养型的细胞。BHK-21/叙利亚仓鼠肾细胞系BHK-21形态特性：上皮样；生长特性：贴壁生长；BHK-21/叙利亚仓鼠肾细胞系BHK-21属专利保藏，其特征特性尚未公开。

BHK-21/叙利亚仓鼠肾细胞系BHK-21培养条件：MEM-EBSSMinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarlesBalancedSalts)10%FBS；传代方法：1：3传代，3-4天传1次；传代情况C5。为探索悬浮培养型BHK-21/叙利亚仓鼠肾细胞系BHK-21的生长规律和接种密度，以3.0×105个/mL、4.0×105个/mL、5.0×105个/mL、6.0×105个/mL和7.0×105个/mL等5个接种密度培养了悬浮培养型BHK-21细胞，绘制了细胞生长曲线和活力变化曲线.结果显示，悬浮培养型BHK-21细胞生长曲线呈"S"型，接种培养前24h细胞处于适应期，生长曲线上密度增长不大，期后细胞进入对数增长期，生长密度呈指数增长.以3.0×105个/mL和4.0×105个/mL接种培养的在120h达到增殖密度，分别为4.65×106个/mL和5.59×106个/mL，倍增时间分别为26.9h和26.7h；以5.0×105个/mL、6.0×105个/mL和7.0×105个/mL接种培养的在96h就达到增殖密度，分别为5.14×106个/mL、5.36×106个/mL和5.1×106个/mL，倍增时间分别为22.4h、24.1h和25.2h.各组在培养的96h以前细胞活力均在90%以上且变化较小，120h和144h时细胞活力开始下降，且接种密度越高活力下降越快.该细胞以4.0×105个/mL、5.0×105个/mL、6.0×105个/mL接种培养能达到较高培养密度，细胞生长快，且细胞峰值持续时间长。

主要参考资料

[1] 农业大词典

[2] 悬浮培养型BHK-21细胞的生长规律和不同接种密度培养效果的研究