异硫氰酸荧光素酯的特性与化学应用
发布日期:2025/1/2 8:51:16
异硫氰酸荧光素酯,英文名为Fluorescein isothiocyanate,常温常压下为黄色至浅黄色固体粉末,它不溶于水但是可溶于常见的有机溶剂包括乙酸乙酯,二氯甲烷和氯仿等。异硫氰酸荧光素酯能与各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断,主要用于医学,农学和畜牧等方面。
图1 异硫氰酸荧光素酯的性状图
特性
异硫氰酸荧光素酯的形态为黄色粉末,有吸湿性,是一种生化试剂,也是医学诊断药物,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。异硫氰酸荧光素酯有两种异构体,其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与蛋白质结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年,是应用最广泛的荧光素。异硫氰酸荧光素酯的主要优点是人眼对黄绿色较为敏感,通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
化学应用
异硫氰酸荧光素酯是生物学中应用最为广泛的一种绿色荧光素衍生物,异硫氰酸荧光素酯具有高吸收率和优良的荧光量子产率等特点。异硫氰酸荧光素酯的异硫氰酸基团可与蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团相结合,从而实现包括抗体,凝集素在内的蛋白标记。FITC 除了用作蛋白质标记物,还可用作蛋白质荧光示踪剂,通过标记抗体而快速鉴定病原体,或是用于蛋白质和多肽(HPLC)的微量测序。异硫氰酸荧光素酯的最大激发波长为 494 nm。一旦激发,在最大发射波长 520 nm 处呈黄-绿色荧光。此外,异硫氰酸荧光素酯也是一种能诱发接触超敏反应 (CHS) 的半抗原,并诱导特应性皮炎模型。[1]
参考文献
[1] 黄春保,慈云祥,常文保.异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白标记物的化学发光反应[J].分析化学,2002,30:3.
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