异硫氰酸荧光素酯标记法的研究

枸杞（L.barbarum）因其具有抗衰老、抗氧化、抗糖尿病、抗癌、细胞保护、神经保护和免疫调节作用等健康益处而被用作药物或药用和功能性食品。枸杞多糖（LBPs）是从枸杞中分离得到的主要成分，对枸杞的生物活性起着重要作用。作为一种天然存在的化学物质，LBPs是一组分子量（Mw）为3-2 300 kDa的水溶性糖缀合物。由于LBPs具有多种药理作用，包括抗氧化、抗衰老、免疫调节、改善肠道菌群和生殖保护，LBPs已在中国的健康食品和药物中得到广泛应用。尽管已经对LBP进行了全面的药理学研究，但鉴于这些化合物的高分子量，关于这些化合物在体内的组织分布研究的信息仍然有限。因此，详细了解其作用机制对于了解其生物活性非常重要。

研究

大多数已发表的关于多糖药代动力学和组织分布的研究使用了许多分析方法来跟踪体内多糖，包括荧光标记结合色谱、同位素标记、分光光度法、荧光分光光度法和生物测定法。最近，基于荧光检测的技术因其特异性、灵敏度和低检测阈值而被用于药物微量分析。异硫氰酸荧光酯素（FITC）是荧光免疫分析中常见的荧光探针，广泛用于蛋白质的荧光标记。FITC是一种用于与其他类型的生物材料或生物分子结合成像的示踪剂。LBPs是一种水溶性蛋白质-多糖复合物，由葡萄糖、甘露糖和半乳糖醛酸聚合而成。由于异硫氰酸酯基（N=C=S）与氨基的高反应性，FITC广泛用于蛋白质标记。用FITC对LBPs中的游离氨基进行修饰，得到具有共价结合荧光素和糖基的可溶性共聚物。有研究人员已根据高效凝胶渗透色谱荧光检测（HPGPC-FD）方法成功合成了FITC标记的LBPs，荧光标记产品（LBP-FITC）的Mv与LBPs相比没有增加。

本研究在FITC预标记的基础上建立了LBP的定量测定方法，并对其在大鼠体内的组织分布进行了研究。了解LBP在体内的组织分布及其潜在的作用靶点具有重要意义，有助于进一步研究其药理活性。

本报告是首次通过FITC荧光标记对LBPs进行研究，以揭示其在大鼠口服给药后的重要基本组织分布。该实验证明LBP-FITC主要被小肠和胃吸收，主要通过肾脏通过尿液排泄；LBP组织分布的这种明显差异可归因于这些LBP的大小与肾脏和肝脏血管床的孔径有关。本研究的结果为LBPs的传统使用提供了额外的科学数据，这些知识将使我们能够全面了解口服LBPs后的生物学效应。