对3T6-Swissalbino/小鼠胚胎成纤维细胞的介绍

背景及概述^[1]

胚胎干细胞是在体外无限增殖、自我更新和多向分化潜能的细胞，这种特性使其在诱导分化、遗传病防治、器官移植等方面具有前景广阔的临床应用价值，同时在新基因的发现、新药开发、功能基因的组织学研究、致畸实验等方面也具有广泛的应用前景。选择化的细胞培养体系对于胚胎干细胞的研究及临床应用至关重要。饲养层对胚胎干细胞自我更新及全能性的维持起重要作用，目前其机制仍未完全阐明，很大程度上与饲养层所提供的细胞接触及复杂的蛋白分子环境有关。小鼠胚胎成纤维细胞因其取材方便、易于制备和作用效果好等优点而成为胚胎干细胞培养首选的且最常用的饲养层细胞。

3T6-Swissalbino细胞是于1963年从分解的瑞士小鼠胚胎中建立的，3T6-Swissalbino细胞能分泌胶原质和透明质酸。检测表明，3T6-Swissalbino细胞肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。3T6-Swissalbino/小鼠胚胎成纤维细胞生长培养基为DMEM高糖＋10%FBS＋1%P/S，气相：空气，95%；CO2，5%，3T6-Swissalbino/小鼠胚胎成纤维细胞培养温度为37℃。

使用注意事项^[1]

3T6-Swissalbino/小鼠胚胎成纤维细胞注意事项：

1)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

2)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。

3)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。

主要参考资料

[1] 小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及饲养层制备