艾瑞布林的适应症

背景及概述^[1][2]

艾瑞布林(eribulin)是一种从海洋生物海绵Halichondriaokadai中提取的大环内酯类化合物halichondrinB的衍生物，是一种具有化学活性的物质。其药用作用机理是通过直接与微管蛋白结合抑制有丝分裂，通过抑制微管生长，抑制癌细胞生长而发挥治疗作用。该药物临床药用成份为艾瑞布林甲磺酸，商品名为Halaven，由日本Eisai公司研发，于2010年11月15日在美国首次上市，美国食品药品管理局(FDA)批准Halaven(甲磺酸艾日布林)用于治疗至少已接受过两次晚期疾病化疗的转移性乳腺癌患者，该药品随后在新加坡、欧盟、瑞士、日本等国家陆续上市。

适应证^[2]

艾瑞布林适用于既往至少接受2次化疗(蒽环类化疗药和紫杉烷类化疗药为基础的化疗方案)的转移性乳腺癌患者。

药理^[2]

艾瑞布林为新型微管动力学抑制剂，具有独特作用机制，能直接与微管蛋白结合，抑制微管蛋白聚合和微管的组建。本品通过对微管的抗有丝分裂作用，破坏有丝分裂纺锤体，阻滞在细胞G2/M周期，抑制微管生长，促使细胞凋亡从而发挥抗肿瘤作用。本品0.25～4.0mg/m2剂量范围的人体药动学为线性模式。平均消除半衰期约为40h，平均分布容积为43～114L/m2，平均清除率为1.16～2.42L(h·m2)。

本品浓度为100～1000ng/mL时人体血浆蛋白率为49%～65%。多次用药的药动学与单次用药相似，每周用药未见体内药物蓄积，其药动学参数与患者性别、年龄及种族无关。本品抑制人肝微粒体内细胞色素P4503A4(CYP3A4)，增加血浆CYP3A4底物浓度。体外试验表明，本品是药物流出转运蛋白P-gp的弱抑制剂。本品主要随粪便排泄(为用药剂量的82%)，其次随尿液排泄(为用药剂量的9%)本品主要以原形随粪便和尿液排出体外，粪便和尿液中的含量分别为88%和91%。体外Amesi试验显示，本品无致突变性，但小鼠及大鼠体内突变试验呈阳性。尚未见致癌性研究报道。对人体生殖功能的影响尚不明确。

临床评价^[2]

一项纳入762例转移性乳腺癌患者的多中心标签开放性随机临床研究中，患者平均年龄55岁(27～85岁)；92%为白种人，64%来自北美、西欧和澳大利亚，25%来自东欧和俄罗斯，11%来自拉丁美洲和南非；患者既往均至少接受过2次化疗，并且在末次化疗6个月内有病情变化。研究评价指标包括应答率和生存期。本品治疗组(n=508)第1、8d静脉输注本品1.4mg/m2，21d为一疗程，平均接受5个疗程(疗程范围1～23个)治疗。对照组(n=254)97%患者接受其他化疗药物单药治疗，3%患者接受激素治疗，使用的化疗药物包括长春瑞滨、吉西他滨、卡培他滨、紫杉烷类和蒽环类药物等。结果显示，本品治疗组总应答率为11%(95%CI：8.6%～14.3%)，对照组为3.9%(95%CI：1.9%～7.1%)。本品治疗组中位生存期为13.1个月(95%CI：11.8～14.3)，对照组为10.6个月(95%CI：9.3～12.5)。本品治疗组患者最常见不良反应为(发生率>25%)中性粒细胞减少、贫血、疲劳、脱发、周围神经病变、恶心和便秘。

另一项在日本进行的单向多中心标签开放性Ⅲ期临床研究，纳入80例晚期转移性乳腺癌患者，既往曾接受蒽环类抗肿瘤药和紫杉烷类药物化疗，于第1个疗程(21d)的第1、8d静脉输注本品1.4mg/m2，研究终点为总应答率。结果显示，总应答率为21.3%(95%CI：12.9%～31.8%)，病情稳定者30例(37.5%)，临床有效率(包括完全应答+部分应答+病情稳定≥6个月的患者所占比例)为27.5%；应答中位持续时间为3.9个月(95%CI：2.8～4.9)；疾病无进展生存期为3.7个月(95%CI：2.0～4.4)，总生存期为11.1月(95%CI：7.9～15.8)。最常见的治疗相关性3～4级不良反应，包括中性粒细胞减少(95.1%)、白细胞减少(74.1%)、中性粒细胞减少性发热(13.6%)以及3度外周神经病变(3.7%)。本品治疗转移性乳腺癌的临床疗效和耐受性良好，可延长既往治疗无效的转移性乳腺癌重症患者的生存期。本品对其他患有顽固性或晚期实体瘤患者(如前列腺癌、肿瘤切除术耐受的转移性卵巢癌、非小细胞肺癌、软组织肉瘤)的临床研究显示出良好的疗效。与其他抗肿瘤药物如吉西他滨、顺铂、表柔比星、曲妥珠单抗、多西他赛以及长春瑞滨联用有协同作用。

不良反应^[2]

艾瑞布林最常见不良反应(发生率>25%)有中性粒细胞减少、外周神经病变、贫血、疲劳、脱发、恶心和便秘。其他不良反应(发生率5%～10%)：流泪增多；消化不良、腹痛和口干等胃肠道症状；注射部位周边水肿；上呼吸道感染；低血钾症；肌无力；味觉障碍、眩晕、失眠和抑郁；皮疹。尚无禁忌症。

注意事项^[2]

注意监测外周血细胞计数，尤其是中性粒细胞计数。视中性粒细胞计数变化适当调整剂量。若中性粒细胞计数<1000/mm3以及血小板计数<75000/mm3时应停止用药。周围神经病变易导致患者终止接受本品治疗，应注意观察。一项纳入26例患者的非对照标签开放性研究显示，本品可能引起QT间期延长。故有先天性长QT间期综合征、充血性心衰、心动过缓和电解质异常者使用本品治疗时需监测心电图，并避免使用延长QT间期药物，包括Ⅰa和Ⅲ类抗心律失常药。

尚无对胚胎及胎儿的毒性试验研究，故妊娠期妇女、准备怀孕妇女及哺乳期妇女慎用。尚未确定18岁以下儿童和65岁以上老年人使用本品的安全性及有效性，儿童与老人应慎用。严重肝、肾受损者慎用。使用本品过量时尚无已知的解毒方法，故需防止药物过量使用。配制本品时注意用0.9%氯化钠注射液稀释，不能将本品稀释于葡萄糖溶液或含葡萄糖的输液内，不能与其他药物同时静脉输注。本品或其稀释液应置于冰箱内冷藏，且本品稀释液只供使用一次，未用完部分应丢弃。

用法与用量^[2]

21d为一疗程，第1、8d输注本品，每次推荐剂量为1.4mg/m2，2～5min输完。

对肝受损和中度肾受损患者(肌酐清除率为30～50mL/min)需减少剂量。推荐剂量：轻度肝受损者：1.1mg/m2；中度肝受损者：0.7mg/m2；中度肾受损患者：1.1mg/m2。每次用药前应视周围神经病变和全血细胞计数调整剂量。

制剂^[2]

注射剂，每支2mL含本品1mg(0.5mg/mL)。

制备^[3]

步骤1：ER-811475：(1，2，3，4，5，6，11，14，17S，19，21，23，25，26，27，31，34)-25-[(2)-2，3-二羟基丙基]-2，5-二羟基-26-甲氧基-19-甲基-13，20-双(亚甲基)-24，35，36，37，38，39-六氧杂七环[29.3.1.13，6.14，34.111，14.117，21.023，27]三十九烷-8，29-二酮

将ER-118046(0.580kg，0.439mol，1eq)在正庚烷中的溶液在≤50℃下真空浓缩。将残留物溶解于无水四氢呋喃(THF)(19.7L)中并在10-25℃下用用咪唑盐酸盐(0.142kg，1.36mol，3.1eq)缓冲的四丁基氟化铵(TBAF)(在THF中的1.0M溶液，2.85L，2.85mol，6.5eq)处理。在证实C34/C35-二醇的水平(≤3%)后，加入甲苯(7.6kg)和水(8.7kg)以便萃取。将水层分离并用甲苯(5.0kg)和THF(5.2kg)萃取。将水层排干，且将有机层与萃取液合并。将合并的有机层在≤35℃下真空浓缩。在浓缩期间，游离的戊醇转化成ER-811475和ER-811474。当游离戊醇的残留水平≥5%时，加入乙腈(ACN)(3.3kg)和水(0.42kg)且在&lt；35℃下真空共沸，直至该水平降到&lt；5%。在完成后，将残留物在真空中与乙腈进一步共沸(4.6kg)&lt；35℃。将残留物用二氯甲烷(7.7kg)稀释且在&lt；35℃下真空共沸，以给出ER-811475和ER-811474的混合物(4：1)。将烯酮ER-118046(135g)在正庚烷中的溶液在41℃或更低真空浓缩。将残留物溶解于无水四氢呋喃(THF)(2.03L)和，-二甲基乙酰胺(675ml)中，且随后在16℃-18℃下用经咪唑HCl(31.5g)缓冲的四丁基氟化铵(TBAF)(在THF中的0.97mol/L溶液，685ml)处理。将混合物在16℃-18℃下搅拌47小时，且反应进展通过HPLC监测。在反应中间体C34/C35-二醇的残留水平达到3%或更低时，加入乙腈(608ml)和水(203ml)。将混合物在16℃-18℃下搅拌45小时，直至游离戊醇的残留水平降到5%以下。包含ER-811475/ER-811474的反应混合物(两种非对映异构体的混合物18：1)可在不进一步纯化的情况下用于下一阶段。

步骤2：ER-076349：(1，3，6，9，12，14，16，18，20，21，22，26，29，31，32，33，35，36)-20-[(2)-2，3-二羟基丙基]-21-甲氧基-14-甲基-8，15-双(亚甲基)-2，19，30，34，37，39，40，41-八氧杂九环[24.9.2.13，32.13，33.16，9.112，16.018，22.029，36.031，35]四十一烷-24-酮

将ER-811475与ER-811474的混合物(0.329kg，0.439mol，1eq)溶解于二氯甲烷(DCM；7.7kg)中并在10-20℃下用在二氯甲烷(1.7kg)中的对甲苯磺酸吡啶鎓(PPTS；0.607kg，2.42mol，5.5eq)溶液处理。将所得混合物在10-20℃下搅拌。主要非对映异构体反应以提供二醇ER-076349，且次要非对映异构体ER-811474保持未反应。当ER-811475的残留水平&gt；1%时，加入在二氯甲烷(0.15kg)中的另外PPTS(0.055kg)，并在10-20℃下继续反应。在完成后，将反应混合物直接装载到用甲基叔丁基醚(MTBE)(200L)预平衡的硅胶柱上。将反应器用二氯甲烷(3.1kg)进一步冲洗，且将冲洗液装载到该柱上。柱用以下物质依次洗脱：(1)甲基叔丁基醚(125L)，(2)在乙腈中的96%v/v甲基叔丁基醚(125L)，(3)在乙腈中的50%v/v甲基叔丁基醚(250L)，和(4)乙腈(225L)。合并所要的部分，在&lt；35℃下真空浓缩，并在真空中在&lt；35℃下与乙腈(4.6kg)共沸。将残留物溶解于乙腈(0.32kg)和水(0.54kg)中并用ER-076349作为晶种(0.27g，0.36mmol)和另外的水(2.70kg)进行结晶。将所得晶体过滤，且监测滤液的重量，直至结晶溶剂的回收比达到≥80%。将晶体用水(2.7kg)进一步洗涤并溶解于二氯甲烷(10.8kg)中，且将溶液在≤25℃下真空浓缩。

将残留物用乙腈(2.1kg)稀释并在≤40℃下真空浓缩，以给出ER-076349(根据ER-118046，55-75%产率)。向ER-811475(与ER-811474混合)中加入咪唑HCl(85.5g)在水(68ml)中的溶液。将溶液在28℃或更低下真空浓缩。将残留物溶解于EtOH(2.69kg)中。将所得混合物在21℃-24℃下搅拌43小时。主要非对映异构体(ER-811475)反应以提供二醇ER-076349，且次要非对映异构体(ER-811474)保持未反应。通过HPLC监测反应物中ER-811475的消失。在ER-811475的残留水平达到低于1%之后，将溶液在37℃或以下更低下真空浓缩。加入甲苯(1.35L)，且将溶液在37℃或更低下真空共沸。加入四氢呋喃(THF)(4.20kg)、甲苯(1.76kg)和水(2.03L)并萃取。分离水层，且将有机层用水(1.01L)洗涤。将水层合并且用甲苯(1.18kg)和THF(1.20kg)萃取。将水层排干，且将有机层与萃取液合并。将合并的有机层在37℃或更低下真空浓缩。加入甲苯(675mL)，且将溶液在38℃或更低下真空共沸。将浓缩物用二氯甲烷(1.01L)稀释且随后装载到用甲基叔丁基醚(大于55.1L)预平衡过的硅胶柱(5.511kg)上。将柱用甲基叔丁基醚(40.8L)、在乙腈中的95%v/v甲基叔丁基醚(24.9L)、在乙腈中的40%v/v甲基叔丁基醚(83.6L)和乙腈(76.3L)依次洗脱以除去未反应的中间体、反应杂质和来自ER-804028的携带杂质。将所要的部分合并并在32℃或更低下真空浓缩以给出ER-076349(测定62.02g，两步的产率为84.0%)。将残留物在29℃或更低下与乙腈(0.533kg)真空共沸且可在不进一步纯化的情况下将其用于下一阶段。

步骤3：艾瑞布林：(1，3，6，9，12，14，16，18，20，21，22，26，29，31，32，33，35，36)-20-[(2)-3-氨基-2-羟基丙基]-21-甲氧基-14-甲基-8，15-双(亚甲基)-2，19，30，34，37，39，40，41-八氧杂九环[24.9.2.13，32.13，33.16，9.112，16.018，22.029，36.031，35]四十一烷-24-酮

将ER-076349(0.259kg，0.354mol，1eq)溶解于甲苯(4.7kg)中并在&lt；25℃下真空共沸。将残留物用甲苯(4.5kg)稀释以给出用于监测水含量的甲苯溶液。水含量通过Karl-Fischer(KF)滴定法测量。如果KF值&gt；125ppm，则将溶液在&lt；25℃下真空共沸并用甲苯(4.5kg)稀释，直至水含量降到≤125ppm。如果KF值达到目标值，则将溶液浓缩并溶解于无水二氯甲烷(6.5kg)中。加入在无水二氯甲烷(84.1g)中的2，4，6-三甲基吡啶(0.172kg，1.27mol，4eq)和吡啶(0.0014g，0.018mol，0.05eq)，并冷却混合物。将TsO(0.124kg，0.380mol，1.07eq)在无水二氯甲烷(3.4kg)中的溶液以维持反应温度≤-10℃的速率加到反应混合物中，且将混合物在≤-10℃下搅拌。当ER-076349的残留量&lt；3%或相应双甲苯磺酸盐的产率大于4%时，反应混合物通过加入水(1.0kg)中止。将混合物加热，且随后在10-30℃下连续地加入异丙醇(IPA)(20.5kg)和氢氧化铵(NHOH；25.7kg)。在环氧化物完全消耗(目标≤0.85%；如果需要，则加入额外的NHOH)后，将反应混合物在&lt；30℃下真空浓缩。向残留物中加入二氯甲烷(20.7kg)和足够量的缓冲溶液NaHCO/NaCO/水(9/9/182w/w/w；不超过5.166kg)并萃取。分离有机层且将水层用二氯甲烷(8.6kg)萃取。将有机层分离并与萃取液合并。

将合并的有机层在&lt；30℃下真空浓缩。将浓缩物用乙腈(4.0kg)稀释且随后装载到用乙腈(200L)预平衡的硅胶柱上。该柱用以下物质依次洗脱：(1)乙腈(100L)，(2)90.0/7.5/2.5v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(152.4L)，(3)85.8/11.7/2.5v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(152.4L)，(4)83.5/14.0/2.5v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(152.6L)和(5)80.0/17.6/2.4v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(&gt；100.2L)。将所要部分合并且在≤40℃下真空浓缩，同时通过加入NHOH维持内部pH在5.5-9.0。向残留物中加入二氯甲烷(13.9kg)和足够量的缓冲溶液NaHCO/NaCO/水(9/9/182w/w/w；不超过15.51kg)并萃取。分离有机层且将水层用二氯甲烷(8.7kg)萃取。将有机层分离并与萃取液合并。将合并的有机层在&lt；30℃下真空浓缩。将残留物溶解于在正戊烷中的75%v/v无水二氯甲烷(6.12kg)中并过滤。将滤液在&lt；30℃下真空浓缩，用乙腈(2.1kg)稀释，并在≤35℃下真空浓缩以给出艾瑞布林(75-95%产率)。

主要参考资料

[1] CN201711223897.4艾瑞布林中间体的合成方法

[2] 抗肿瘤药甲磺酸艾瑞布林(eribulinmesylate)

[3] CN201480066353.X可用于合成软海绵素B类似物的方法