4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的分析测定与研究

简述

4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷又名对硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷，是α-葡萄糖苷酶的显色底物，可用于测量α-葡萄糖苷酶活性[1-2]。体外研究发现，4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷可以通过酶促裂解释放对硝基苯酚。以葡萄糖为原料，经乙酰化，缩合，分离，脱乙酰化4步反应可以合成了目标产物4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷，常温常压下表现为白色至灰白色粉末[3]。

理化性质

密度 1.6±0.1 g/cm³

沸点 582.2±50.0℃ at 760 mmHg

熔点 210-216℃

分析测定

实验建立高效液相色谱法测定4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的含量，具体参数如下：

色谱柱：Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm)

流动相：甲醇-水(759:25)

流速：为0.8 mL·min^-1

紫外检测器：检测波长303 nm

柱温：35℃

结果发现，4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的浓度在13.5～135.0μg·mL^-1的范围内，峰面积与浓度呈良好线性 (r=0.9999)，平均回收率为99.7%(n=6)。上述方法简便，快速，准确，可用于4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的含量测定[4]。

有关研究

以裂叶荨麻为原料，用70%乙醇对其进行提取，以醇提物为研究对象，测定其黄酮含量。以抗环血酸(VC)为阳性对照，通过测定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率，羟基自由基(·OH)清除率及总还原力来评价裂叶荨麻醇提物体外抗氧化能力。以4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷(4-Nitrophenylα-D-glucopyranoside,PNPG)为底物，研究裂叶荨麻醇提物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果表明，裂叶荨麻醇提物中黄酮含量为12.09 mg/g，对DPPH自由基的最大清除率为92.76%，半抑制浓度(IC50)为9.960μg/mL，对羟基自由基的最大清除率为98.05%，IC50值为1.123 mg/mL，总还原力随醇提物浓度的增加而增强；对α-葡萄糖苷酶的最大抑制率为59.06%，IC50值为31.598 mg/mL。以上实验结果说明裂叶荨麻醇提物具有明确的体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制作用，有望开发成为抗氧化降糖功能性食品[5]。

参考文献

[1]. Zeng L, et, al. Inhibitory mechanism of morin on α-glucosidase and its anti-glycation properties. Food Funct. 2016 Sep 14;7(9):3953-63.

[2]. Binder TP, et, al. p-Nitrophenyl alpha-D-glucopyranoside, a new substrate for glucansucrases. Carbohydr Res. 1983 Dec 23;124(2):287-99.

[3]孙家莉,褚婕,丁晓琴.酶底物对硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷的合成[J].化学试剂, 2005, 27(002):97-98.DOI:10.3969/j.issn.0258-3283.2005.02.012.

[4]杨萍,陈丽宇,王晓琳,等.高效液相色谱法测定对硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷的含量[J].药物分析杂志, 2011, 31(4):2.DOI:CNKI:SUN:YWFX.0.2011-04-044.

[5]杨文娟,何亚娟,毛跟年,等.裂叶荨麻醇提物体外抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究[J].食品研究与开发, 2020, 41(3):6.DOI:CNKI:SUN:SPYK.0.2020-03-003.