如何配制1 M和1.5 M Tris-HCl缓冲液？
发布日期:2024/10/18 9:48:26
Tris-HCl缓冲液是一种常用的生物化学缓冲剂，其有效 pH 范围通常在pH7.0-9.0之间。Tris（三羟甲基氨基甲烷）是一种应用广泛的有机物，化学式为C4H11NO3，白色结晶颗粒。1M Tris-HCl (pH8.8)溶液，可用于配制SDS-PAGE或native PAGE的上层胶，用于蛋白电泳分离。
配制1 M Tris-HCl缓冲液的方法如下：
称量121.1g Tris置于1L烧杯中。
加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
根据所需的pH值，按下表量加入浓盐酸进行调节：
pH 7.4：约70mL浓盐酸
pH 7.6：约60mL浓盐酸
pH 8.0：约42mL浓盐酸
将溶解定容至1L。
高温高压灭菌后，室温保存。
配制1.5 M Tris-HCl缓冲液的步骤如下：
称取181.7g Tris置于1L烧杯中。
加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
用浓盐酸调pH值至8.8。
将溶液定容至1L。
高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
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