蛋白浓度测定试剂盒的特性

背景及概述^[1]

试剂盒是一种将测定一种成分所需要的2种或2种以上的试剂及实验室一般用品连同操作说明书包装在一起，形成商品化的试剂单位，即由厂家提供给用户使用的一种套装试剂，使用者除用自备的蒸馏水或试剂盒提供的缓冲液进行复溶试剂的操作外不需要作任何试剂配制。目前检测试剂已广泛采用这一方式提供，kit的应用不但节约人力减少配制误差，而且有利于试剂质量的保证和实验室间方法学的统一，提高了可比性。

特性^[1]

蛋白浓度测定试剂盒有多种，其中Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BradfordProteinAssayKit)是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一。Bradford法研制而成，实现了蛋白浓度测定的快速、稳定和高灵敏度，并且检测数据有很好的线性关系。Bradford法的检测原理是考马斯亮蓝(CoommassieBrilliantBlue)G-250与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸特别是精氨酸(Arginine)在酸性介质中结合后，溶液转变为蓝色，溶液吸收峰从465nm迁移到595nm，颜色的变化与蛋白质浓度成正比。因此，可通过检测595nm处的吸光度对溶液中蛋白质浓度进行测定。

Bradford蛋白浓度测定试剂盒检测速度极快，10-20个样品只需不足10分钟即可完成，和BCA法相比大大缩短了检测时间。Bradford蛋白浓度测定试剂盒检测灵敏度高，最小蛋白检测量达到0.5μg。BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCAProteinAssayKit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。

BCA蛋白浓度测定试剂盒灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl。在50-2000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的TritonX-100，5%的Tween20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1mMβ-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。

主要参考资料

[1] 协和医学词典