秦皮苷的制备方法

背景及概述^[1]

中药秦皮是多基原品种，2010年版《中国药典》收载其正品原植物有木犀科苦枥白蜡树、白蜡树、尖叶白蜡树或宿柱白蜡树。除苦枥白蜡树外，其他3种植物在陕西秦巴山区及周边地区均有分布。根据孙三省和邬家林对中药秦皮的考证认为，秦皮的主流原植物是尖叶白蜡树（陕西秦皮）和苦枥白蜡树（东北秦皮）2个种。秦皮中主要有效成分有秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷等天然香豆素类，分别具有抗病原微生物、抗炎和利尿及抗氧化等作用，此外还含有大量的酚类、皂苷及糖类成分。上述几种天然香豆素成分中，秦皮苷等秦皮提取物已经应用于治疗眼疾的滴眼液，高纯度的秦皮甲素可以作为生化检测试剂和化妆品助剂。但迄今为止，针对秦皮中秦皮甲素和秦皮苷纯化工艺研究的文献较少。

应用^[2-3]

秦皮苷是从木犀科白蜡树，尖叶白蜡或宿柱白蜡的干燥树皮中提取的香豆素类化合物。已有研究表明其具有抗炎，降低血尿酸，抗菌，利尿的药理作用。秦皮苷能够降低活性氧（ROS）的产生与释放、抑制炎症因子的产生和释放，抑制信号通路MAPKs的激活，从而减少血管内皮多糖包被的降解，进而降低血管通透性，以致于预防或治疗ARDS。此外，秦皮甲素和秦皮苷均有一定的利尿作用。以小鼠为研究对象，通过拆方研究评价热痹消配方中秦皮等组分在降低痛风患者血尿酸方面的作用，结果表明每天33mg/kg秦皮和33mg/kg土茯苓给药可明显降低血中尿酸含量。

制备^[4-5]

方法1：一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)采用甲醇或水常规方法得到含秦皮甲素、秦皮苷等不同质量浓度的秦皮提取物；

(2)制备双水相体系，并分离得到双水相的上相和下相溶液，用上相溶液反复溶解秦皮提取物，至秦皮提取物中不含有秦皮甲素和秦皮苷为止；

(3)离心或过滤上述含有秦皮甲素和秦皮苷的溶液后，加入上述溶液1～3倍量的下相溶液，充分萃取，至上相中的固形物杂质比例不再明显减少为止，分离得到的上相溶液，浓缩得到主要含秦皮甲素和秦皮苷的溶液；

(4)采用常规手段除盐及脂溶性杂质成分后，浓缩、结晶得到高纯度秦皮甲素和秦皮苷。

方法2：从秦皮中分离纯化秦皮素、秦皮苷、秦皮甲素和秦皮乙素的方法，步骤为：

（1）秦皮提取物的制备：取粉碎好的秦皮药材，用乙醇或甲醇回流提取，提取液经回收溶剂得到提取物；

（2）柱层析纯化：将秦皮提取物用甲醇溶解，上Superose12柱进行层析分离纯化，用甲醇‑水或乙醇‑水为洗脱液进行洗脱，洗脱液流速为每小时1‑10倍柱体积，流出液由紫外检测器在254nm检测，收集目标组分馏分，将得到的馏分减压浓缩，得到高纯度秦皮素、秦皮苷、秦皮甲素和秦皮乙素的单体化合物。

主要参考资料

[1] 多基原秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的纯化工艺研究

[2] CN201810494962.5秦皮苷在制备预防或治疗急性呼吸窘迫综合征药物中的应用

[3] 秦皮的研究进展

[4] CN201410519725.1一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法

[5] CN201210434068.1从中药秦皮中分离纯化单体化合物的方法