秦皮甙的主要应用

背景及概述^[1]

秦皮为常用中药，始载于《神农本草经》，列为中品，来源为木犀科植物苦枥白蜡树(大叶白蜡树)FraxinusrhynchophyllaHance.、小叶白蜡树F.bungeanaDC.或秦岭白蜡树F.paxianaLingelsh.的树皮。主产于陕西、河北、河南、山西、辽宁、吉林等地。它的主要功效为清热燥湿、平喘止咳、明目，临床上用于治疗肠炎、白带过多、慢性支气管炎、细菌性痢疾、目赤肿痛、迎风流泪、牛皮癣等。现代药理学实验表明秦皮有抗炎、镇痛及止咳祛痰的作用。秦皮的主要化学成分为香豆素类化合物，此外还含有酚类、皂苷、鞣质、生物碱等。秦皮中的香豆素类成分有秦皮甲素(esculin，又名七叶苷、七叶灵、马栗树皮苷等)、秦皮乙素(esculetin，又名七叶素、七叶亭、马栗树皮素等)、秦皮甙(fraxin，又名白蜡素苷、白蜡树苷)、秦皮素(fraxetin，又名秦皮亭、白蜡素、白蜡树内酯)。

应用^[1-2]

秦皮甙是从木犀科白蜡树，尖叶白蜡或宿柱白蜡的干燥树皮中提取的香豆素类化合物。研究表明其具有抗炎镇痛，降低血尿酸，抗菌，利尿等的药理作用。在构建急性呼吸窘迫综合征的动物损伤模型的基础上，有研究通过HE、伊文思蓝（Evan-blue）染色、荧光探针、免疫荧光标记，蛋白质免疫印记等验证秦皮甙能够降低活性氧（ROS?）的产生与释放、抑制炎症因子的产生和释放，抑制信号通路MAPKs的激活，从而减少血管内皮多糖包被的降解，进而降低血管通透性，以致于预防或治疗ARDS。

1.抗炎作用

秦皮中的秦皮甲素、秦皮乙素和秦皮甙均具有明显的抗炎作用。有研究表明，秦皮具有抗炎镇痛和降低血尿酸的作用，用于治疗痛风疗效甚佳，其有效成分为秦皮甲素和秦皮乙素等香豆素类成分。以兔软骨细胞为对象，研究了秦皮乙素对蛋白多糖新陈代谢的抑制作用，结果表明秦皮乙素可用于治疗骨关节炎和风湿性关节炎造成的软骨损伤。

2. 利尿

秦皮甲素和秦皮甙均有一定的利尿作用。以小鼠为研究对象，通过拆方研究评价热痹消配方中秦皮等组分在降低痛风患者血尿酸方面的作用，结果表明每天33mg/kg秦皮和33mg/kg土茯苓给药可明显降低血中尿酸含量。

制备^[3-4]

方法1：一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮甙的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)采用甲醇或水常规方法得到含秦皮甲素、秦皮甙等不同质量浓度的秦皮提取物；

(2)制备双水相体系，并分离得到双水相的上相和下相溶液，用上相溶液反复溶解秦皮提取物，至秦皮提取物中不含有秦皮甲素和秦皮甙为止；

(3)离心或过滤上述含有秦皮甲素和秦皮甙的溶液后，加入上述溶液1～3倍量的下相溶液，充分萃取，至上相中的固形物杂质比例不再明显减少为止，分离得到的上相溶液，浓缩得到主要含秦皮甲素和秦皮甙的溶液；

(4)采用常规手段除盐及脂溶性杂质成分后，浓缩、结晶得到高纯度秦皮甲素和秦皮甙。

方法2：从细叶杜香里同时提取鉴定抗氧化活性成分七叶树素、秦皮甙、秦皮素和白藜芦醇的方法，包括如下步骤：

（1）原料选取和预处理：取大兴安岭细叶杜香的嫩枝为原料，经过室温阴干后制成长度为0.5-1.0cm的前处理样品。

（2）加压溶液提取技术提取粗提物：取预处理样品1-2克与双倍重量的海沙混合填装于加速溶剂萃取管（ASE）中后放入密闭避光的提取箱中，在提取温度115℃，提取压力1500psi的条件下，用加速溶剂萃取管容积的60%-70%的体积分数为65%的甲醇静止提取20-30min后收集溶剂，用加速溶剂萃取管容积的30%-40%的体积分数为65%的甲醇溶液对加速溶剂萃取管进行冲洗，用氮气将提取溶液全部冲出后收集所有提取溶液，利用旋转蒸发仪在45-50℃下将提取液制成浸膏粗提物。

（3）On-lineHPLC-ABTS+在线鉴定抗氧化组分：将步骤（2）获得的浸膏粗提物用1mL甲醇溶解并过滤后取5μL进样到On-lineHPLC-ABTS+在线检测系统中；HPLC的检测条件设定：移动相A为乙腈，B为水，流速为1mL/min；冲洗梯度为：0-5min，体积分数为10%的乙腈；5-30min，体积分数为40%乙腈；30-40min，体积分数为100%乙腈；柱子型号为Kromasil100–5C18Column(250×4.6mmi.d，5μm)，检测波长为330nm；2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）溶液的流速为0.5mL/min，检测波长734nm；

（4）保留时间为7.41min的峰即为七叶树素、保留时间为11.71min的峰即为秦皮甙、保留时间为15.22min的峰即为秦皮素、保留时间为17.43min的峰即为白藜芦醇。

主要参考资料

[1] CN201810494962.5秦皮甙在制备预防或治疗急性呼吸窘迫综合征药物中的应用

[2] 秦皮的研究进展

[3] CN201410519725.1一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮甙的方法

[4] CN201310511195.1一种从细叶杜香中提取鉴定七叶树素、秦皮甙、秦皮素和白藜芦醇的方法