HIPK4抗体的应用

背景^[1-3]

HIPK4抗体是用于研究HIPK4（同源结构域相互作用蛋白激酶4）蛋白的抗体。HIPK4是同源结构域相互作用蛋白激酶家族的一员，它在多种生物过程中发挥作用，包括细胞分裂、内稳态和凋亡的调控。HIPK4抗体可用于多种科学研究应用，如Western Blot、免疫组织化学、免疫细胞化学等。

HIPK4抗体

以下是一些提供HIPK4抗体的供应商及其产品信息：

Abcam：提供兔多克隆抗体（产品编号ab69565），适用于Western Blot、免疫组织化学和免疫细胞化学。推荐的稀释比例如下：Western Blot 1/500-1/1000，免疫组织化学1/50-1/100，免疫细胞化学1/500-1/1000。

赛默飞世尔科技公司：提供HIPK4多克隆抗体（产品编号HIPK4-401AP），适用于Western Blot、免疫细胞化学、免疫沉淀和ELISA。推荐的稀释比例如下：Western Blot 1:500-1:1,000，免疫细胞化学1:500，ELISA 1:10,000。

Santa Cruz Biotechnology：提供小鼠单克隆抗体（产品编号729C2C），推荐用于human来源的HIPK4 WB检测。

赛默飞世尔科技公司：提供HIPK4多克隆抗体（产品编号PA5-101204），适用于Western Blot、免疫组化（石蜡）和免疫细胞化学。推荐的稀释比例如下：Western Blot 1:500-1:1,000，免疫组化（石蜡）1:50-1:200，免疫细胞化学1:100-1:500。

GeneTex：提供兔多克隆抗体（产品编号GTX33990），适用于Western Blot。推荐的稀释比例如下：Western Blot 1:500-1:2000。

在使用HIPK4抗体时，请根据实验需求和所选抗体的说明书来调整稀释比例和实验步骤。不同抗体可能会有不同的最佳使用条件，因此在实验前仔细阅读抗体的使用说明非常重要。

应用^[4][5]

HIPK4抗体可以用于帕金森模型中过表达α-突触核蛋白诱导铁死亡的作用及机制研究

选取了三种不同的PD动物模型:（1）过表达A53T突变型α-syn(SNCAA53T)的转基因小鼠模型（以下简称为A53T模型小鼠）,（2）脑立体定位注射携带SNCAA53T基因的腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）至黑质区所构建的AAVSNCA（A53T）大鼠模型(以下简称为AAVSNCA（A53T）模型大鼠),（3）鱼藤酮诱导的PD小鼠模型（以下简称为鱼藤酮模型小鼠）,以及过表达SNCAA53T的细胞模型（inducible PC12,i PC12）。在上述PD动物和细胞模型,分别检测了过表达α-syn对铁死亡的影响,并在AAVSNCA（A53T）大鼠模型上,采用多组学（蛋白组学、磷酸化蛋白组学和转录组学）、生物信息学和分子生物学相结合的方法,筛选并验证了α-syn调控铁死亡的可能激酶。

为了验证蛋白激酶功能,我们在PC12细胞上用DOX诱导α-syn过表达后,通过siRNA干扰技术分别干扰上述30个激酶的表达,最后通过免疫印迹检测GPX4蛋白水平的变化。HIPK4抗体结果如下:（1）与对照组相比,分别干扰DYRK家族的激酶Hipk2、Dyrk1a和Dyrk1b后,经HIPK4抗体检测GPX4蛋白水平均显著下降（P<0.05,P<0.01）;分别干扰该家族的激酶Hipk1和Hipk4后,GPX4蛋白水平均显著上升（P<0.05,P<0.01）;干扰激酶Dyrk3后,GPX4蛋白水平无明显变化。（2）与对照组相比,分别干扰PKC家族的激酶Prkcz、Prkcb和Prkcd后,GPX4蛋白水平均显著下降（P<0.05,P<0.01）;干扰该家族的激酶Prkch和Prkci后,GPX4蛋白水平显著上升（P<0.05,P<0.01）;分别干扰激酶Prkca、Prkce、Prkcg和Prkcq后,GPX4蛋白水平无明显变化。（3）与对照组相比,分别干扰CK1家族的激酶Csnk1g2和Ttkk2后,GPX4蛋白水平显著下降（P<0.05）;干扰该家族的激酶Csnk1g1后,GPX4蛋白水平显著上升（P<0.05）;分别干扰激酶Csnk1e、Csnk1d、Ttbk1、Vrk2和Vrk3,GPX4蛋白水平无明显变化。（4）与对照组相比,干扰MAPK家族的激酶Mapk15后,GPX4蛋白水平显著下降（P<0.05）;干扰该家族的激酶Mapk4后,GPX4蛋白水平无明显变化。（5）与对照组相比,分别干扰CK2家族的激酶Csnk2a1和Csnk2a2后,GPX4蛋白水平无明显变化。（6）与对照组相比,分别干扰CAMKL家族的激酶Brsk2和Mark2后,GPX4蛋白水平无明显变化。（7）与对照组相比,干扰AGC家族的激酶Stk32a后,GPX4蛋白水平无明显变化。在上述siRNA干扰实验中,干扰激酶Hipk2对GPX4蛋白水平影响最为明显,乳酸脱氢酶（LDH）结果显示,与对照组相比,干扰Hipk2后,细胞的LDH释放明显升高（P<0.01,P<0.001）。

参考文献

[1]Cell death-osis of dopaminergic neurons and the role of iron in Parkinson's disease.[J].Lima Illyane Sofia;Pêgo Ana Catarina;Barros João Tomas;Prada Ana Rita;Gozzelino Raffaella.Antioxidants&redox signaling,2020

[2]Ferroptosis Mechanisms Involved in Neurodegenerative Diseases.[J].Reichert Cadiele Oliana;de Freitas Fábio Alessandro;SampaioSilva Juliana;RokitaRosa Leonardo;Barros Priscila de Lima;Levy Debora;Bydlowski Sérgio Paulo.International journal of molecular sciences,2020

[3]Mechanisms of Mitochondrial Iron-Sulfur Protein Biogenesis[J].Roland Lill;;Sven-A.Freibert.Annual Review of Biochemistry,2020

[4]Ferroptosis and Cancer:Mitochondria Meet the“Iron Maiden”Cell Death[J].Anna Martina Battaglia;;Roberta Chirillo;;Ilenia Aversa;;Alessandro Sacco;;Francesco Costanzo;;Flavia Biamonte.Cells,2020

[5]李冲.帕金森模型中过表达α-突触核蛋白诱导铁死亡的作用及机制研究[D].青岛大学,2021.