对人肾成纤维细胞的相关研究

背景及概述^[1]

人肾成纤维细胞分离自肾组织。人肾成纤维细胞是肾脏结缔组织中最重要的细胞类型，在体外培养中，一般大致成梭形、多角形或不规则形等，为贴壁生长型细胞。刚分离的人肾成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。人肾成纤维细胞主要功能有：①组成过滤屏障内壁的重要部分；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。

相关研究^[2-5]

有实验研究大黄素对人肾成纤维细胞增殖的影响。在体外人肾成纤维细胞培养的基础上，采用3HTdR掺入法观察了不同浓度大黄素(10、30、50、80、100μg/ml)对人肾成纤维细胞3HTdR掺入率的影响。同时，利用流式细胞仪观察了大黄素(10、50、100μg/ml)对细胞周期的影响。结果显示大黄素以剂量依赖方式降低了人肾成纤维细胞3HTdR掺入率(r=0995，P001)。大黄素(50和100μg/ml)抑制了人肾成纤维细胞细胞周期的进程(P001)。因此大黄素通过抑制细胞DNA合成，延迟细胞周期的进程，抑制了细胞增殖，这一结果为大黄素的临床应用提供了部分实验依据。

此外，有研究观察汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙3种中药成分对人肾成纤维细胞（KFB）的影响。方法采用ELISA法、四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、流式细胞仪、免疫组织化学法分别检测汉防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙对人KFB分泌的I型胶原酶活性、人KFB增殖、凋亡、I型胶原表达的影响。结果汉防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙3种中药提取成分在各自的浓度范围和作用时间内均能提高人胎KFB分泌的I型胶原酶活性、抑制人胎KFB增殖和Ⅰ型胶原的表达、促进人胎KFB凋亡。结论汉防己甲素、川芎嗪苦杏仁甙在预防及逆转肾间质纤维化中起重要作用。

还有实验研究三七总甙(PNS)对人肾成纤维细胞(KFB)增殖、分泌I型胶原、表达整合素β1的影响。方法：体外培养KFB，分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、ELISA法、流式细胞仪检测PNS对KFB增殖、分泌Ⅰ型胶原及表达整合素β1的影响。结果：PNS在浓度范围和作用时间内可明显抑制KFB细胞增殖及分泌Ⅰ型胶原(与空白对照组比较，P005)，同时显著降低了KFB上整合素β1的表达(与空白对照组比较，P005)。因此PNS可成为防治肾间质纤维化的有效药物。

此外，有研究观察血管紧张素II(AngII)对人肾成纤维细胞(KFB)的影响。　方法：采用ELISA法、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪、免疫组织化学法分别检测AngⅡ对KFB分泌的胶原酶活性、KFB增生、凋亡、I型胶原表达的影响。结果AngII能提高KFB分泌的总胶原酶活性、促进KFB增生、抑制KFB凋亡、促进KFBI型胶原的表达。因此AngⅡ能通过促进KFB增生、抑制KFB凋亡、促进KFBI型胶原的表达来促进肾间质纤维化。

主要参考资料

[1] 运动解剖学、运动医学大辞典

[2] 大黄素对人肾成纤维细胞增殖的影响

[3] 汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙对人肾成纤维细胞的影响

[4] 三七总甙对人肾成纤维细胞的影响

[5] 血管紧张素Ⅱ对人肾成纤维细胞的影