三磷酸腺苷二钠的用途和制备

背景技术

三磷酸腺苷二钠，化学名：腺嘌呤核苷－5’－三磷酸酯二钠盐三水合物，分子式：C10H14N5Na2O13P3·3H2O，分子量：605.19，是核苷酸衍生物，参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。当体内吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应等需要能量时，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同时释放出能量。三磷酸腺苷二钠能够穿透血-脑脊液屏障，能提高神经细胞膜性结构的稳定性和重建能力、促进神经突起的再生长。三磷酸腺苷二钠是辅酶类药物，临床用于因组织损伤、细胞酶活力下降所致的各种疾病。如心力衰竭，心肌炎、心肌梗塞、脑动脉硬化、冠状动脉硬化、进行性肌萎缩、脑出血后遗症、急慢性肝炎、肝硬化和听力障碍等，还用于进行性肌萎缩、脑溢血后遗症、心功能不全、心肌疾病及肝炎等治疗。

加工生产

一种节约能耗的三磷酸腺苷二钠的制备工艺，包括如下步骤：

1)生化反应

(1)氯化镁溶液、腺苷溶液、苯扎溴铵溶液的制备：

①用少量反渗透水溶解氯化镁制成氯化镁溶液；

②用适量室温的反渗透水溶解腺苷制成腺苷溶液；

③用适量的反渗透水溶解苯扎溴铵稀释成5％苯扎溴铵溶液；

(2)投放速冻酵母：加反渗透水于反应锅中，开动搅拌用夹套热水加热至40-45℃，投放蔗糖及磷酸二氢钾和磷酸氢二钾，使其溶解，待其全部溶解后，停止加热，开循环水降温，当温度降至40℃以下时，投放速冻酵母，并用夹套热水缓慢升温；

(3)ATP生化反应：当反应锅内温度升至20℃±1时，依次投放氯化镁溶液、苯扎溴铵溶液、腺苷溶液，反应开始计时，将反应液继续加热至36-39℃，保温，待有气泡溢出，开始取样测定ATP转化率，当反应达到ATP－条带时，反应结束；

(4)灭活、调酸碱：反应结束，立即放掉夹套热水，迅速投放大量冰于反应锅内，并通冷却水降温，当温度降至4℃以下，用磷酸调pH至2.5-3.0，1小时后，再用液碱调pH至5.5-6.0，调好碱后30分钟开始压榨，压榨完毕，再用反渗透水顶洗滤饼，水顶液合并压榨液，检验含量、透光度，合格送分离工段处理；

2)树脂分离

(1)上样：将压榨液及水顶液稀释至0.2-0.45％，上D296树脂柱，流速为4-6L/min，定时检测流出液，查看是否有ATP漏出；当流出液中ATP浓度≥0.03％时，停止上样，用反渗透水正顶至流出液ATP浓度≤0.01％后，继续上样，如此反复直至上样结束；

(2)水洗杂质：上样结束，用反渗透水正进洗涤至流出液A257nm≤0.2；然后反进水洗至树脂上层无浑浊机械杂质且流出液A257nm≤0.2后结束；流速控制在4-6L/min；

(3)稀盐洗杂质：水洗结束，用pH2.0-2.2的0.04mol/LNaCl--0.01mol/L HCl稀盐液反进流洗，流速为6-10L/min；每小时取样，测流出液中ATP浓度，当流出液中ATP浓度≥0.03％时，反进洗杂质结束；改正进，正进流速不变，每小时取样一次，测流出液中ATP的浓度，当流出液中ATP浓度≥0.025％时，每半小时取样一次监测；当流出液pH跳至2-4，且ADP基本洗尽或只有ATP时，洗涤结束，开始洗脱；

(4)洗脱：用pH3.5-3.8的1mol/LnaCl-0.01mol/L HCl浓盐液进行洗脱，当洗脱流出液ATP浓度>0.38％时，收集洗脱液，送脱色；当洗脱流出液ATP浓度<0.38％时，即停止收集；

3)精制

(1)脱色：洗脱液根据色泽加入0.1-0.5％活性炭和0.1-0.3％硅藻土搅拌1小时脱色，离心分离过滤后，脱色液经检验合格后送超滤除蛋白；

(2)超滤：将脱色液用<1万分子量的超滤膜进行超滤除蛋白，合格后送去结晶；

(3)结晶：超滤液先用CP级HCl调pH至2.5-3.3，再用＞1万分子量的超滤膜进行超滤除蛋白，合格后放入结晶釜，开动搅拌，开始加入95％(v/v)乙醇，出现白色混浊前酒精加入速度控制在100L/h；出现白色混浊时，停止加酒精，搅拌半小时，然后继续加酒精至料液体积的1.5-2.0倍，保持温度搅拌半小时，然后开夹套冷却水，将料液冷至室温，静止1小时；

离心分离结晶液，湿品先用95％(v/v)酒精洗涤，再用无水乙醇浸泡，最后甩干送去干燥；母液调pH至6.0-7.0后送蒸馏工段进行回收酒精；

4)干燥包装

(1)干燥：将湿品放入真空干燥箱中，真空度≤－0.10Mpa，控制温度在40-42℃，干燥2个小时，然后，调整真空度≤－0.08Mpa，控制温度在37-38℃，干燥4个小时，水分≤8％时可出料；

(2)包装：将合格的产品按规定的批量放入混合器中混合15-20分钟，然后按进行包装送检，合格入库；

所用原料的用量按重量份计为：腺苷38份、速冻酵母920份、磷酸二氢钾38份、磷酸氢二钾235份、氯化镁18份、蔗糖210份、苯扎溴铵溶液22份、反渗透水1950份。