DMEM/F12 1:1 液体培养基的应用

背景及概述^[1]

DMEM/F12 1:1 液体培养基又叫DMEM/F12培养基，用于细胞培养。含15mM HEPES，3151 mg/L D-葡萄糖，55mg/L丙酮酸钠，365 mg/L L-谷氨酰胺，1200mg/L碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。

应用^[2-5]

一、CN201710508337.7公开了一种MSCs来源的少突胶质细胞制备试剂盒，包括OPCs无血清基础培养基、OPCs培养添加剂1、OPCs培养添加剂2及OPCs培养表面包被液，其中，所述OPCs无血清基础培养基为含有B27，N2，L-谷氨酰胺，1,25-二羟维生素D3，三碘甲状腺氨酸，人褪黑素的DMEM/F12培养基；所述OPCs培养添加剂1为含有重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人表皮生长因子的DMEM/F12培养基；所述OPCs培养添加剂2为含有重组人血小板来源生长因子AA、重组人神经营养因子3的DMEM/F12培养基；所述OPCs培养表面包被液为含有重组人层黏连蛋白、重组人玻连蛋白的DMEM/F12培养基。

二、CN201610622230.0提供一种脂肪细胞保护液，所述保护液主要是将低氧保护剂、维生素C和氨基糖苷类抗生素用DMEM/F12培养基水溶液溶解而成，每mL所述DMEM/F12培养基水溶液分别溶解所述低氧保护剂5-10mg、所述维生素C10-50μg、所述氨基糖苷类抗生素50-200U，所述DMEM/F12培养基水溶液的浓度为30-40mg/mL。本发明提供的脂肪细胞保护液性能稳定，可以较长时间地保存脂肪细胞，起到有效保持脂肪干细胞活性、保护脂肪干细胞的作用，并能提高脂肪干细胞的增殖能力，可以满足将脂肪细胞运输到国内大多数地区及周边国家的要求，并且安全无毒，可以直接应用于人体。

三、CN201610622368.0提供一种骨髓干细胞保护液，所述保护液主要是将低氧保护剂、肝素钠和氨基糖苷类抗生素用DMEM/F12培养基水溶液溶解而成，每mL所述DMEM/F12培养基水溶液分别溶解所述低氧保护剂5-10mg、所述肝素钠0.01-0.05U、所述氨基糖苷类抗生素50-200U，所述DMEM/F12培养基水溶液的浓度为30?40mg/mL。本发明提供的骨髓干细胞保护液性能稳定、安全无毒，可以起到有效保护骨髓干细胞的作用，使骨髓干细胞可以在体外长期保存并保持细胞活性，维持其原有的多向分化能力，扩大了骨髓干细胞临床应用的范围，利用现有交通工具，即可运输到国内大多数城市及周边国家。

四、CN201811547543.X涉及一种秦川肉牛肌内脂肪细胞的分离纯化和鉴定方法，使用II型胶原酶对秦川肉牛背最长肌进行消化，经II型胶原酶消化后的组织块用含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基中和，经过滤、离心得到细胞，细胞再经洗涤、离心后重悬于含有10％FBS的DMEM/F12培养基中，计数后，将细胞接种在培养皿中，在CO2培养箱中培养1.5小时，用无菌磷酸缓冲盐溶液洗涤除去非粘附细胞，然后将细胞培养在37℃、CO2浓度为5％的培养箱中，每隔2天换一次培养基，待细胞汇合度达到70％?80％后，进行细胞免疫荧光标记阳性细胞鉴定。该方法获得的肉牛肌内脂肪细胞具有较高的前脂肪细胞阳性比率，为提高肌内脂肪沉积的同时不增加皮下及内脏脂肪沉积的研究奠定了基础。

主要参考资料

[1] DMEM/F12 1:1 液体培养基说明书

[2] CN201710508337.7MSCs来源的少突胶质细胞的制备方法及试剂盒

[3] CN201610622230.0一种脂肪细胞保护液及其制备方法审中-实质审查

[4] CN201610622368.0一种骨髓干细胞保护液及其制备方法

[5]CN201811547543.X一种秦川肉牛肌内脂肪细胞分离的方法