a-MEM液体培养基的应用

背景及概述^[1]

a-MEM液体培养基用于细胞培养，保存条件：2-8°C，一年有效。产品成分：不含核糖核酸和脱氧核糖核酸，青霉素100U/ml，链霉素100μg/ml，1000mg/L D-葡萄糖，292mg/L L-谷氨酰胺，110mg/L丙酮酸钠，2200mg/L碳酸氢钠，pH值7.0-7.4。

使用说明^[1]

培养基长期放置，需要2-8度避光保存，请勿低温冻存。

其中添加的L-谷氨酰胺会有一定的半衰，长期放置后使用发现细胞生长变慢请添加L-谷氨酰胺，来维持细胞的正常代谢。

如果多人使用，建议分装成100ml或 250ml的规格，以防止使用过程中交叉污染。

含有一定量的NaHCO₃的培养基暴露在空气中 PH值会上升，培养基的颜色会由桃红变微紫，可使用Hepes盐调节到正常PH范围再进行细胞培养。

应用^[2-3]

CN201010569165.2提供了一种快速分离骨髓间充质干细胞的试剂盒及方法。该试剂盒包括洗涤液，细胞培养液A，细胞培养液B，细胞消化液，其中洗涤液为磷酸盐缓冲液；细胞培养液A为α-MEM液体培养基；细胞培养液B为胎牛血清；细胞消化液A为质量/体积百分比浓度为0.25%的胰蛋白酶液。与传统分离培养方法相比，采用此试剂盒，利用骨髓冲出细胞，培养液贴壁培养24小时后半量换液方式进行培养和纯化，得到的细胞纯度高，增殖更快，一般7天即可完成原代细胞培养。将原代细胞传代，利用培养液进行培养，一般2-3天细胞密度即可达到90%，为利用骨髓间充质干细胞进行进一步实验研究提供了丰富的来源。

CN201010569210.4提供一种诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的试剂盒及方法。该试剂盒包括成骨细胞诱导培养液和成骨细胞鉴定液。诱导培养液包括细胞培养液A、细胞培养液B、细胞培养液C、细胞培养液D、细胞培养液E。成骨细胞鉴定液包括细胞固定液、染色剂和洗涤剂。所述细胞培养液A为α-MEM液体培养基；细胞培养液B为胎牛血清；细胞培养液C为地塞米松溶液；细胞培养液D为β-甘油磷酸钠溶液；细胞培养液E为维生素C溶液；细胞固定剂为4%的多聚甲醛；染色剂为硫代硫酸钠、硝酸银和中性红；洗涤剂为双蒸水。

主要参考资料

[1] a-MEM液体培养基说明书

[2] CN201010569165.2一种快速分离骨髓间充质干细胞的试剂盒及方法

[3] CN201010569210.4一种诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的试剂盒及其应用和诱导细胞分化的方法