核酸外切酶III的介绍

背景及概述^[1]

核酸外切酶是指水解酶类中几种亚类酶的总称(EC3.1.11.13.14.15.16)。它们催化单个核苷酸残基的水解，只水解DNA或RNA链的末端核苷酸。该酶在核酸的分解代谢、维持和修复中起重要作用，可用于多核苷酸的序列测定。催化核酸链末端的磷酸二酯键水解而逐个切下核苷酸的一类酶。EC3.1.11～16。按底物专一性分为DNA外切酶、RNA外切酶以及对DNA和RNA均可作用的核酸外切酶.其中，有的从5′-端开始，逐个切下3′-核苷酸;有的从3′-端开始，逐个切下5′-核苷酸;也有的可从5′-或3′-端开始，逐个切下5′-核苷酸。

ExonucleaseIII（核酸外切酶III）具有以下4种催化活性：(1)3’→5’外切脱氧核糖核酸酶活性，尤其适合双链：ExonucleaseIII（核酸外切酶III）降解dsDNA的平末端、5’-突出末端或切口，从DNA链的3’-端释放5’-单磷酸核苷酸，产生单链DNA片段。该酶对具有3’-突出末端(至少有4个碱基，且具有3’-末端C残基)的DNA(1)、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。2）3’-磷酸酶活性：ExoIII切除3’-末端的磷酸基团，产生3’-OH基团。3）RNaseH活性：ExoIII外切核酸酶活性，降解RNA-DNA杂合体中的RNA链。4）脱嘌呤/脱嘧啶-内切核酸酶活性：ExonucleaseIII（核酸外切酶III）切割脱嘌呤或脱嘧啶位点的磷酸二酯键，产生5’-端无碱基的脱氧核糖5’-磷酸残基。ExonucleaseIII（核酸外切酶III）切割DNA的速度极大程度上依赖于反应温度、盐浓度以及DNA与酶的摩尔比例(4，8)。每次实验的优化条件都需重新测试。

主要参考资料

[1] 农业大词典