5’DNA腺苷化试剂盒的介绍

背景及概述^[1]

试剂盒是一种将测定一种成分所需要的2种或2种以上的试剂及实验室一般用品连同操作说明书包装在一起，形成商品化的试剂单位，即由厂家提供给用户使用的一种套装试剂，使用者除用自备的蒸馏水或试剂盒提供的缓冲液进行复溶试剂的操作外不需要作任何试剂配制。目前检测试剂已广泛采用这一方式提供，kit的应用不但节约人力减少配制误差，而且有利于试剂质量的保证和实验室间方法学的统一，提高了可比性。腺苷为一天然核苷酸，是机体代谢的中间产物，也是体内重要活性成分之一。其作用系通过激活腺苷受体(A受体)而实现。在心房、窦房结及房室结，腺苷通过与A受体结合而激活G蛋白偶联的钾通道，使K⁺外流增加，细胞膜超极化而降低自律性。它还能明显增加cGMP水平，延长房室结的ERP和减慢传导，抑制交感神经或异丙肾上腺素所致早后、迟后除极而发挥抗心律失常作用。

5’DNA腺苷化试剂盒能将DNA寡核苷酸5’端腺苷化，试剂盒操作简便高效，反应需要MthRNA连接酶、ATP和5’-磷酸化的单链DNA。试剂盒经过优化，无论有无3´-teminator，都能够生成腺苷化的DNA。通常该试剂盒能将95%的pDNA转化成AppDNA，高效的转化不仅增加产量，还能避免胶回收提纯步骤。5’DNA腺苷化试剂盒组份：MthRNA连接酶（重组酶）、5´DNA腺苷化缓冲液（10X）及1mMATP。5’DNA腺苷化试剂盒周转率低，需要约等量摩尔浓度的酶和底物DNA相互作用。在二代测序cDNA文库构建实验中，预腺苷化DNA的连接头可用于RNA3´末端的连接。

主要参考资料

[1] 协和医学词典

[2] 最新药物手册