一种银杏内酯A与银杏内酯B的精制方法

银杏内酯A与银杏内酯B是银杏中二萜内酯类化合物，是一类特异有效的血小板活化因子受体拮抗剂。此外，银杏总内酯还包括银杏内酯C、银杏内酯J、银杏内酯M和白果内酯等。银杏总内酯中各单体的药效和功用存在一定差异。银杏内酯A、银杏内酯B对治疗心脑血管疾病具有显著疗效。为开发高效新药，控制药品质量，有必要对银杏内酯A和银杏内酯B进行高纯度分离。

传统的精制方法

文献报道的银杏内酯A、银杏内酯B单体分离方法主要有醇类提取―溶剂萃取―柱色谱分离法，醇类提取―溶剂萃取―反相色谱分离法，色谱分离―重结晶法和超临界流体萃取法(SCFE)等。

ZL00117758.3（《由银杏叶或银杏叶浸膏制备药物银杏内酯A,B的方法》）：该方法是向银杏叶或其浸膏加入乙醇等浸取剂，得到的浸取液经过滤、分层，取出有机相去杂，然后经浓缩、干燥获得富集银杏内酯A和B，采用制备型液相色谱再分离A与B。该方法运用制备色谱进行分离，缺点在于制备银杏内酯A与银杏内酯B生产能力小，难于实现工业化。

ZL201010536023.6（《一种银杏内酯A的制备方法》）：其特征在于包含下列步骤：将银杏叶粗提物用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离，即可；其中，所述的大孔反相吸附树脂的参数如下：粒径为50-l00μm，孔径为90-110A，树脂骨架为聚苯乙烯―二乙烯苯。该制备方法缺点在于只分离得到银杏叶中银杏内酯A，其它内酯类成分被舍弃，提高了该工艺的成本，浪费原料。

现有的方法中，有的只是得到一种银杏内酯A或银杏内酯B的单体成分，有的工艺流程较长，不易实现工业化。因此，需要研究能同时纯化银杏内酯A与银杏内酯B，适于工业化生产的精制方法。

发明内容

本发明提供一种银杏内酯A与银杏内酯B的精制方法。

本发明方法包括下列步骤：

（1）萃取：取银杏叶提取物浸膏，加入有机溶剂进行多次萃取，合并萃取液，回收溶剂至干，用含水乙醇定容至浓度为0.2-1.0g/ml；

（2）过柱层析富集：将上述药液通过反相吸附树脂柱进行富集，依次用不同浓度的含水乙醇进行除杂、洗脱，分段收集洗脱液，分别将洗脱液浓缩至浸膏，分别得到银杏内酯A与银杏内酯B粗品；

（3）结晶：将上述银杏内酯A与银杏内酯B粗品浸膏用含水乙醇进行多次重结晶，即得到高纯度的银杏内酯A与银杏内酯B精制品。

本发明所得银杏内酯A与银杏内酯B含量分别为95-98%。

本发明的优点主要在于：

①本方法通过乙酸乙酯萃取后，萃取液一次过柱即可分离银杏内酯A与银杏内酯B，提高原料的利用效率，节约成本。

②对银杏内酯A和银杏内酯B的粗品分别进行重结晶，提高了银杏内酯A和银杏内酯B单体的纯度。

③将结晶后的母液合并后并入下一批药液中继续过柱富集，提高了银杏内酯A与银杏内酯B的回收率。

本方法用银杏叶提取物为原料，工艺简单，减少损失，同时分离纯化银杏内酯A与银杏内酯B。全过程除乙醇和乙酸乙酯外，不用其它有机溶剂，可实现溶剂回收利用的绿色生产。产品纯度高，适于工业化生产，有较大的应用价值。