天青石蓝B染色液的应用

背景^[1-3]

天青石蓝B染色液是一种用于病理学和组织学的染色剂，主要由0.5%的天青石蓝B组成。

天青石蓝B染色液通常与明矾苏木素联合使用。在Van Gieson染色中，酸可脱掉大部分苏木素的颜色，使细胞核几乎看不到。在这种情况下，使用铁苏木素或天青石蓝可以抵抗酸的影响，达到满意的染色效果。天青石蓝B的优势在于它能抗酸，并且高铁盐可以加强明矾苏木素与细胞核的结合力，使细胞核染色更深，因此可以达到抗酸的目的，使苏木素的颜色不易褪去。

操作步骤通常包括：将石蜡切片脱蜡，梯度乙醇水化至水，然后入天青石蓝B染色液浸染，最后冲洗并按需继续进行下游实验。注意事项包括染色液放置时间延长会导致染色力下降，染色时间需相应延长；冰冻切片的染色时间应缩短；在无缓冲液的福尔马林溶液中浸泡时间较长的组织及脱钙组织染色时间应延长；为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

天青石蓝B染色液

此外，天青石蓝B是一种特殊的生物染料，可以代替苏木精用于显微镜或其他用途。它是一种有机化合物，分子式为C17H18ClN3O4，具有特定的物理化学性质。

天青石蓝B染色液的具体使用方法和注意事项可能会因实验的具体需求和条件而有所不同。因此，在实际应用中，建议参考相关文献或咨询专业人士，以获得更准确和详细的指导。

应用^[4][5]

天青石蓝B染色液可以用于具有不同荷电性质的DNA杂交指示剂研究

利用电化学和紫外-可见光谱方法,研究了天青石蓝B染色液、中性山奈酚以及阴离子型核固红等不同荷电性质杂交指示剂与DNA的相互作用。实验结果显示,杂交指示剂与双链DNA结合后均形成非电活性的超分子物质,从而导致响应信号峰电流减小。并且,随着鲑鱼精dsDNA的加入,紫外-可见光谱最大吸收峰逐渐减小且伴有红移现象,表明这三种不同荷电性质杂交指示剂均能与DNA双螺旋结构以嵌插方式结合。天青石蓝、山奈酚和核固红与dsDNA均形成2:1型的复合物,结合常数分别为1012.87、109.68和1011.71。以这三种不同荷电性质杂交指示剂分别构建电化学DNA传感器,并用于骨肉瘤耐药相关基因、手足口病标志基因和西尼罗病毒标志基因的检测。

主要内容包括以下三个部分:1、利用天青石蓝B染色液为杂交指示剂,构建了检测骨肉瘤耐药相关基因的电化学DNA生物传感器。在优化实验条件下,该传感器能够较好地区分杂交溶液中的互补序列、单碱基错配序列、完全错配序列。在血清模拟样品体系中,传感器响应信号峰电流与互补链DNA的浓度(在1.0×10-95×10-7mol/L范围内)呈较好的线性关系,线性回归方程为ΔI(μA)=0.62038+0.36576lgC(DNA(nM)),线性相关系数r=0.9905,检测限为0.046 nmol/L(S/N=3)。该传感器可实现对骨肉瘤耐药相关基因的灵敏、特异、定量检测。在血清模拟样品体系中,可以准确地检测到互补序列,而不受干扰序列的影响。2、通过中性指示剂山奈酚制备的电化学DNA生物传感器,成功地对手足口病相关标志基因进行了快速定量检测。实验结果显示,由山奈酚制备的传感器,具有高度灵敏性和特异性。在血清模拟际品体系中,在当传感器的响应信号峰电流与互补链DNA的浓度在5.0×10-95×10-7mol/L范围内,二者呈较好的线性关系,线性回归方程为ΔI(μA)=0.7192+0.5012lgC(DNA(n M)),线性相关系数r=0.9908,检测限为0.167nmol/L(S/N=3)。实现了手足口病标志基因在人工模拟样品体系中的快速检测。3、以阴离子型核固红为杂交指示剂制备的电化学DNA生物传感器,能够对模拟样品体系中西尼罗病毒标志基因进行快速定量检测。互补链DNA的浓度在5.0×10-85×10-7 mol/L范围内,传感器的响应峰电流与其浓度呈较好的线性关系,线性回归方程为ΔI(μA)=-0.823+0.7676lgC(DNA(nM)),线性相关系数r=0.9910,检测限为3.513 nmol/L(S/N=3)。此传感器成功地对西尼罗病毒标志基因进行了快速检测。

参考文献

[1]Studies of the interaction between Aloe-emodin and DNA and preparation of DNA biosensor for detection of PML-RARαfusion gene in acute promyelocytic leukemia[J].Xin Hua Lin;;Hong Yan Wan;;Ya Feng Zhang;;Jing Hua Chen.Talanta,2007(4)

[2]Electrochemical studies of the interaction of Basic Brown G with DNA and determination of DNA[J].You Qin Li;;Yu Jing Guo;;Xiu Fang Li;;Jing Hao Pan.Talanta,2006(1)

[3]Determination of nucleic acids based on the fluorescence quenching of Hoechst 33258 at pH 4.5[J].Yuan Guan;;Wen Zhou;;Xiaohui Yao;;Meiping Zhao;;Yuanzong Li.Analytica Chimica Acta,2006(1)

[4]Chromatographic and electrochemical determination of quercetin and kaempferol in phytopharmaceuticals[J].R.Aguilar-Sánchez;;F.áhuatl-García;;M.M.Dávila-Jiménez;;M.P.Elizalde-González;;M.R.G.Guevara-Villa.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2005(2)

[5]叶基兴.具有不同荷电性质的DNA杂交指示剂研究[D].福建医科大学,2018.