营养琼脂的应用

背景^[1-3]

营养琼脂是一种常用的微生物培养基，主要用于一般细菌的培养。其成分主要包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠以及琼脂。这些成分提供了细菌生长所需的营养物质。其中，蛋白胨和牛肉膏富含氮源、碳源以及多种维生素，是细菌生长的重要能量来源；氯化钠则用于调节培养基的渗透压，使其接近细菌生长的自然环境；琼脂则作为凝固剂，使培养基形成固体状态，便于细菌在其表面生长并形成菌落。

营养琼脂的制备过程相对简单，主要是将各成分溶解于蒸馏水中，加热溶解，然后校正pH值至适宜范围，最后分装、灭菌即可。根据使用目的的不同，琼脂的用量也会有所调整。例如，用于菌落计数时，琼脂量通常为1.5%；而用于制作平板或斜面时，琼脂量则为2%。

此外，市场上也有现成的营养琼脂药品供应，这些产品已经调配好各成分的比例，并调整了pH值，用户只需加水后即可直接制作培养基，无需自行配制。这为实验室工作提供了极大的便利。

营养琼脂

营养琼脂在微生物学、食品科学、医药等领域具有广泛的应用。例如，在食品工业中，营养琼脂可用于检测食品中的微生物污染情况；在医药领域，它可用于细菌的培养和鉴定，为疾病的诊断和治疗提供依据。

虽然营养琼脂为细菌的生长提供了良好的环境，但并非所有细菌都能在其上生长。因此，在选择培养基时，应根据目标细菌的特性进行选择。同时，制备和使用营养琼脂时，也应注意遵守实验室安全规范，避免交叉污染和其他安全问题。

应用^[4-5]

营养琼脂可以用于钟山区鸡沙门氏菌病病原分离及耐药性研究

沙门氏菌病是一种人畜共患病,而且随着抗菌药物的滥用,沙门氏菌耐药性越来越强,使得该病的防控变得越来越复杂。基于六盘水市钟山区鸡沙门氏菌病比较常见,且防控困难的现实,本研究在对六盘水市钟山区沙门氏菌病进行流行病学调查的基础上,开展了沙门氏菌的分离鉴定、药敏试验、耐药基因分析等研究。

1. 钟山区鸡沙门氏菌病流行病学调查及其病原菌分离与鉴定。本研究于2017年1月～2019年12月期间对两种不同养殖方式的6个养鸡场的鸡群进行定期采样(每两个月采集一次血清样本),通过平板凝集试验检测沙门氏菌特异性抗体;通过临床症状观察和系统的病理剖检对发病鸡进行初步诊断,然后采集病鸡的肝脏、脾脏、心脏组织样本进行沙门氏菌分离,分别使用普通营养琼脂培养基、营养肉汤和麦康凯琼脂固体培养基进行培养,观察细菌生长状态;通过革兰氏染色观察细菌形态;利用14种生化管对分离菌进行生化特性鉴定;对3株分离菌的16S r DNA基因进行PCR扩增、测序及遗传进化分析。平板凝集试验结果显示,所调查的养鸡场中沙门氏菌平均检出率为22.3%,其中地面平养方式养鸡场的平均检出率为26.4%,笼养方式养鸡场的平均检出率为18.4%,可见地面平养鸡群的沙门氏菌病相较笼养鸡群更为严重。对发病鸡的临床诊断结果显示,病鸡精神萎顿,怕冷且不愿走动,羽毛松乱,翅下垂,腹泻且粪便在泄殖腔周围呈白色浆糊状;剖检可见其肝脏、脾脏等肿大充血,且脾脏表面有结节,腹腔内存在腹水,肠道炎症等,其症状和剖检病变与鸡沙门氏菌病相符。

分离培养结果显示,分离菌在普通营养琼脂培养基上的菌落为直径2～4mm,白色半透明、湿润光滑、圆形且边缘整齐,在麦康凯培养基上的菌落为无色透明、圆形隆起,均与沙门氏菌的培养特性一致。革兰氏染色结果显示,分离菌为大小均匀、两端钝圆、无荚膜、无芽孢的红色短杆菌,符合典型的沙门氏菌革兰氏染色特征。

参考文献

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[2]A reduced graphene oxide-titanium dioxide nanocomposite based electrochemical aptasensor for rapid and sensitive detection of Salmonella enterica[J].Shalini Muniandy;;Swe Jyan Teh;;Jimmy Nelson Appaturi;;Kwai Lin Thong;;Chin Wei Lai;;Fatimah Ibrahim;;Bey Fen Leo.Bioelectrochemistry,2019

[3]Detection of Salmonella from chicken rinsate with visible/near-infrared hyperspectral microscope imaging compared against RT-PCR[J].Matthew Eady;;Gayatri Setia;;Bosoon Park.Talanta,2019

[4]Molecular determination of H antigens of Salmonella by use of a microsphere-based liquid array.[J].McQuiston John R;;Waters R Jordan;;Dinsmore Blake A;;Mikoleit Matthew L;;Fields Patricia I.Journal of clinical microbiology,2011

[5]陈尧贵.钟山区鸡沙门氏菌病病原分离及耐药性研究[D].贵州大学,2022.