从杜仲中提取(+)-环橄榄树脂素的方法

发布日期:2024/3/20 8:40:55

背景技术

(+)-环橄榄树脂素是Stereospermum personatum的主要成分，Stereospermum personatum是应用于传统的印度药物体系中的药用植物，也被广泛倡导用于制备利尿剂、溶石药、除痰剂、强心剂、壮阳剂、开胃剂、抗炎剂、抗菌剂、治疗消化不良、腹泻、肾和膀胱结石、咳嗽、哮喘、剧渴、痔疮以及胃酸过多症的药物。(+)-环橄榄树脂素具有医学价值的抗氧化药物分子相比的自由基清除特性，具有抗氧化和抗血小板凝集作用。

(+)-环橄榄树脂素

目前已知的杜仲的化学成分中含有木脂素类化合物(+)-环橄榄树脂素。研究发现杜仲中的(+)-环橄榄树脂素具有抗氧化、抗炎、抗纤维化作用，能缓解高血压引起的肾脏血管重构。最近研究还发现能够显著提高MCAO大鼠的神经功能评分，减少梗死面积，提示其可能具有神经保护作用。因此，从天然产物中提取和分离具有活性的(+)-环橄榄树脂素具有重要意义。

提取方法

1)使用水回流提取方法提取杜仲干燥树皮10公斤两次，然后将水溶液在真空条件下进行浓缩，得到萃取物(500g)；

2)通过大孔树脂柱层析的方法分离纯化萃取物，用大孔树脂HPD-100充分吸附萃取物，使用流动相为EtOH-H2O(体积比从100:0到5:95)进行梯度洗脱，梯度洗脱比例依次为100％、85％、70％、50％、30％和10％浓度的乙醇水溶液，依次收集不同部分洗脱液；

3)收集70％乙醇部分进行浓缩后进一步通过硅胶柱层析分离，使用流动相为CH2Cl2-MeOH(体积比从100:0到50:50)进行梯度洗脱，梯度洗脱比例依次为CH2Cl2-MeOH的体积比100:0、100:5、100:10、100:15、100:20、100:25和50:50，分段收集洗脱液，得到7个部分(按洗脱顺序依次为部分1-7)；

4)取上述部分3通过硅胶柱层析进行分离，使用流动相为CH2Cl2-MeOH(体积比从100：0到100：10)进行梯度洗脱，梯度洗脱比例依次为CH2Cl2-MeOH的体积比100:0、100:2、100:5、100:8和100:10，分段收集洗脱液，得到5个部分(按洗脱顺序依次为部分3 .1-3 .5)；

5)取上述部分3.4通过半制备高效液相色谱(HPLC)进行分离，使用流动相为CH3CN-H2O(0～30min，22％～28％)，得到(+)-环橄榄树脂素(2.2mg，tR=15.6min)。tR为(+)-环橄榄树脂素的出峰时间，收集主峰部分。