兔多克隆抗体制备服务的流程
发布日期:2020/2/5 10:44:14
背景及概述[1][2]
将抗原性物质免疫动物,由于这种物质多由不止一种抗原分子组成,有时即使是一种,也是由多种抗原决定簇组成,这种抗原可刺激具有相应抗原受体的不同淋巴细胞克隆,因此产生多种抗血清抗体——多克隆抗体。兔多克隆抗体以制备周期短、识别表位多、可以进行沉淀反应及凝集反应等优点,一直是科学研究工作者的重要工具。
服务内容[2]
1、客户可提供抗原用于制备多克隆抗体,抗原可包含:天然蛋白、重组蛋白、细胞或细胞提取液、病毒或病原体、菌种或菌体蛋白、小分子多肽、化合物;其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶联载体蛋白。
2、客户可提供蛋白名称、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息,根据客户的实验需求设计抗原,合成多肽抗原或表达蛋白抗原,免疫动物制备多克隆抗体。
3、可提供抗体标记、抗体对筛选、试剂盒开发、免疫学检测等增值服务。
服务的流程[2]
服务步骤及内容
周期
交付内容
交付标准
抗原制备
抗原复核
1-2 天
• 2*0.5 mL/兔子免疫前血清
• 纯化抗体(每只兔 30-40 mL 血清将全部用于纯化)
• CoA
• 剩余抗原
血清 ELISA 效价>1:64,000
UV 及 SDS- PAGE 分析
免疫及血清效价检测
8-10 周
• 免疫前采血
• 2 只兔子免疫
• 血清效价检测
• 最终采血
纯化(可选)
3 天
• 蛋白 A 亲和纯化
• 抗原亲和纯化(依客户要求选择纯化方法)
QC 分析
3 天
• SDS-PAGE 及 UV 分析
• ELISA 检测
抗原要求[2]
蛋白抗原:
蛋白总量为 2.5-4 mg/只兔子,分子量>10kD,电泳纯度>90%,浓度>0.5 mg/mL,缓冲液为 PBS 或经义翘确认对实验无影响的溶液。
多肽抗原:
KLH/VLP 偶联多肽总量 3-5 mg/只兔子,浓度>0.5 mg/mL,缓冲液为 PBS 或经义翘确认对实验无影响的溶液;
OVA/Biotin 标记多肽总量 2-3 mg,浓度>0.1 mg/mL,缓冲液为 PBS 或经义翘确认对实验无影响的溶液。
参考文献
[1] 儿科学辞典
[2] 兔多克隆抗体制备服务技术说明书
欢迎您浏览更多关于兔多克隆抗体制备服务的相关新闻资讯信息