Madb-106的应用

背景^[1-3]

MADB-106，也被称为MADB106或大鼠乳腺癌细胞，是一种来源于F344大鼠的乳腺癌细胞系。这些细胞具有上皮细胞样的形态，并且呈现出贴壁生长的特性。在培养条件下，MADB-106细胞需要使用特定的培养基，通常是DMEM基础培养基加上10%的胎牛血清（FBS）和1%的双抗（P/S）。

MADB-106细胞被广泛用于科学研究中，特别是在生物学、医学和药学等领域。由于其具有乳腺癌的特性，这些细胞可以用于研究乳腺癌的发病机制、药物筛选和疗效评估等。此外，MADB-106细胞也可以作为模型细胞系，用于研究细胞生长、分化、凋亡和信号转导等生物学过程。

在培养MADB-106细胞时，需要注意细胞传代比例、换液频率和培养条件等因素，以保证细胞的生长状态和实验结果的准确性。同时，由于这些细胞是来源于大鼠的，因此在实验过程中需要遵守相关的动物实验伦理和法规。

MADB-106

MADB-106细胞培养操作

1)复苏MADB-106细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)MADB-106细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)MADB-106细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

应用^[4-5]

MADB-106细胞可以用于丙泊酚对荷瘤大鼠MADB106肿瘤细胞肺转移及E-cadherin和β-catenin的影响

丙泊酚可抑制MADB-106细胞的肺转移,并下调转移瘤中MTA1和Wntl的表达,表明丙泊酚可能通过Wnt通路抑制肿瘤的转移及增殖。为进一步探讨丙泊酚对肿瘤转移的作用及机制,本研究通过MADB-106细胞肺转移大鼠模型,观察不同剂量丙泊酚对肿瘤肺转移及转移瘤组织E-cadherin和β-catenin表达的影响。

材料和方法1.实验动物、药品和试剂清洁级Fischer344雄性大鼠,12～14周龄,体重200～220g。鼠抗人E-cadherin单克隆抗体(即用型),鼠抗人β-catenin单克隆抗体(即用型)；丙泊酚。

2. 肿瘤细胞培养MADB-106细胞,MADB-106细胞是大鼠乳腺腺癌细胞系的一种选择性变异,经静脉注入Fischer344大鼠循环系统后,只高选择性地种植转移在大鼠肺部。MADB-106细胞在RPMI1640培养液(1640基础培养基90%,FBS10%,双抗0.1%)中培养,放于37℃,100%湿度和5%C02的培养箱中培养,并通过使用0.25%胰蛋白酶消化后传代培养。

3.动物分组和处理40只大鼠随机分为4组：生理盐水组(S组)；脂肪乳剂组(F组)；丙泊酚30mg/kg组(P1组)；丙泊酚50mg/kg组(P2组),每组10只。1%戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射后行股静脉置管,经大鼠股静脉持续泵入等容量生理盐水,脂肪乳剂和丙泊酚,维持鼠肛温在36-37℃,呼吸频率约为60次/分,心率320-340次/分左右；给药1小时后经大鼠股静脉注入0.5mL MADB-106细胞(2×105/ml),拔除股静脉置管,缝合切口,在SPF级环境中饲养三周。

参考文献

[1]Wnt signaling induces gene expression of factors associated with bone destruction in lung and breast cancer[J]. Rachelle W. Johnson;;Alyssa R. Merkel;;Jonathan M. Page;;Nazanin S. Ruppender;;Scott A. Guelcher;;Julie A. Sterling.Clinical & Experimental Metastasis,2014(8)

[2] Propofol induces endoplasmic reticulum (ER) stress and apoptosis in lung cancer cell H460[J]. Wen-Yao Cui;;Yan Liu;;Yong-Qiang Zhu;;Tao Song;;Qiu-Shi Wang.Tumor Biology,2014(6)

[3] Gene of the month: E-cadherin (CDH1)[J]. Tamara M H Gall;;Adam E Frampton.Journal of Clinical Pathology,2013(11)

[4] Anandamide inhibits the Wnt/β-catenin signalling pathway in human breast cancer MDA MB 231 cells[J]. Chiara Laezza;;Alba d’Alessandro;;Anna Maria Malfitano;;Maurizio Bifulco.European Journal of Cancer,2013

[5]汪威. 丙泊酚对荷瘤大鼠MADB106肿瘤细胞肺转移及E-cadherin和β-catenin的影响[D].南方医科大学,2016.