鸭脚树叶碱的应用与制备

背景及概述^[1]

灯台叶，学名FoliumAlstoniaeScholaris，产广东、云南等地，本品为两广及云南等地少数民族用药。生物碱和黄酮是灯台叶的主要成分，茎叶含多种吲哚类生物碱，如鸭脚树叶碱（picrinine）、卟啉碱（porphyrine）等。生物碱是灯台叶重要的活性物质，其中以鸭脚树叶碱(picrinine)的含量最高，是台灯叶的标识性成分，是制剂的控制项目。鸭脚树叶碱为无色的针状晶体，易溶于甲醇、氯仿、丙酮，可溶于乙酸乙酯、乙醇，不溶于水和石油醚；易溶于稀盐酸及稀硫酸，加碱中和后溶液变浑浊后复析出沉淀。鸭脚树叶碱是灯台叶的标识性成分，是制剂的控制项目，因此寻找一种分离鸭脚树叶碱的方法，对鸭脚树叶碱进行更多药理和活性进行研究是很有必要的。

结构

应用^[2]

鸭脚树叶碱(Picrinine)化合物具有显著的止咳、平喘、化痰、抗炎和镇痛活性，为糖胶树中的活性成分，而且含量较高，占药材的0.1％左右。可用于在制备治疗感冒、发热及其所导致的呼吸道疾病的药物的质量指标控制。鸭脚树叶碱(Picrinine)对感冒、发热及其所导致的呼吸道疾病具有治疗作用。药理实验和药效学试验证明鸭脚树叶碱具有显著的止咳、平喘、化痰、抗炎和镇痛活性。鸭脚树叶碱对II相疼痛反应亦有非常显著的抑制作用，但对I相疼痛没有明显作用。说明鸭脚树叶碱为外周镇痛作用，而对中枢系统没有明显作用。

制备^[1，3]

方法1：一种从灯台叶中提取分离鸭脚树叶碱的方法，该方法以灯台叶为原料；通过以下技术方案实现本发明目的：

1）在干燥的灯台叶中加入其质量5～7倍的酸水煎煮2～3次，每次2～3小时，过滤；合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.10，用氯仿萃取三次，除去氯仿层，剩余萃余液用碱调pH至9～10，再用氯仿萃取三次，收集合并氯仿萃取液，浓缩干燥后得生物碱；

2）生物碱用体积浓度80～90%的乙醇溶液或甲醇溶液溶解，过滤，在滤液中加入质量浓度0.01～0.02%的三乙胺水溶液，使滤液中乙醇或甲醇浓度为25～30%，然后通过树脂柱吸附生物碱，先用3～4倍柱体积的洗脱液Ⅰ洗脱杂质，再用洗脱液Ⅱ洗脱，收集鸭脚树叶碱段洗脱液，浓缩，干燥即得鸭脚树叶碱粗品，其中洗脱液Ⅰ是将三乙胺添加到质量浓度40～45%的乙醇水溶液或甲醇水溶液中制得质量浓度0.01～0.02%的三乙胺甲醇水溶液或三乙胺乙醇水溶液；洗脱液Ⅱ是将三乙胺添加到质量浓度50～55%的乙醇水溶液或甲醇水溶液中制得质量浓度0.01～0.02%的三乙胺甲醇水溶液或三乙胺乙醇水溶液；

3）鸭脚树叶碱粗品用其质量4～5倍的氯仿溶解后，上入硅胶柱中，先用2～3倍柱体积氯仿洗脱，再用氯仿-乙酸乙酯梯度洗脱，收集鸭脚树叶碱段洗脱液，浓缩干即得鸭脚树叶碱；

4）将步骤（3）鸭脚树叶碱用丙酮溶解后，滴加石油醚至晶体出现，静置结晶，过滤，反复操作2～3次，最后晶体真空干燥，即得鸭脚树叶碱。

方法2：灯台树叶粉碎成颗粒，取10kg，用15倍量1%硫酸水溶液渗漉提取，提取液滤过加入截留分子量2000的中空纤维素超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300的中空纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液过AB‑8大孔树脂柱，适量水洗脱，收集下柱液和水洗液用氨水调节ph9，放置沉淀，离心，沉淀物用90%甲醇溶解回流溶解，加溶液量的1%的活性炭脱色，脱色液滤出活性炭，加1/10体积的石油醚，充分搅拌冷藏结晶，结晶物再用70%乙醇溶液重结晶，干燥得白色晶体15g，含量检测90.5%。

含量测定^[4]

一种HPLC测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法，包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：取鸭脚树叶碱对照品与甲醇制成对照品溶液；

(2)制备待测样品溶液：精密取面条树样品加甲醇稀释，制得待测样品溶液；

(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，建立鸭脚树叶碱标准曲线；

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得鸭脚树叶碱的峰面积，从而根据标准曲线获得鸭脚树叶碱含量；所述步骤(3)和(4)的色谱条件：250mm×4.60mm，5μm，Thermo-Gold-C18色谱柱；流动相：甲醇-水-二乙胺＝45：55：0.005；流速：1.0ml·min-1；检测波长：287nm；柱温：35℃；进样体积：10μl。本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。

主要参考资料

[1] CN201810562176.4一种鸭脚树叶碱的提取分离方法

[2] CN200610010941.9治疗呼吸道相关疾病的药物及其应用

[3] CN201110428005.0一种制备鸭脚树叶碱的方法

[4] CN201711369914.5HPLC测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法