荧光光谱法测定食品中的酸性红 27

背景技术

酸性红 27是常见的水溶性色素，用作于食品添加剂，可被添加至果汁饮料、碳酸饮料，也可用于配制糖果、酒、青梅、山楂制品等。测定苋菜红有很多方法，除了国家标准规定的薄层层析、示波极谱法、高效液相色谱法（HPLC）外，还有荧光光谱法、分光光度法、离子色谱法、液质联用法、微柱法、纸上层析法、导数吸附伏安法、极谱法和紫外-可见吸收光谱法。目前对苋菜红含量测定的多种方法，有些方法太过复杂，检测过程消耗时间长，不易大范围使用。有些方法虽然简单高效，但所用设备昂贵，分析成本较一般方法高，分析时间较长，不易于推广。本文所选用的荧光光谱法样品使用量少，方法简单，高效且准确性好，对酸性红 27的含量测定具有重要意义。

检测方法

1、酸性红 27标准液的配制

酸性红 27标准液的配制：于100mL小烧杯中加入准确称取的酸性红 27样品1.0000g，溶解后，转移至1L容量瓶中定容，摇匀，配制1.0×103mg/L的酸性红 27标准溶液。

2、测定方法

于10mL比色管中，加入定量的浓度为1.0×10³mg/L标准酸性红 27溶液(或样品溶液)，用二次蒸馏水稀释至刻度，摇匀，在最佳激发波长为320nm、激发单元狭缝和发射单元狭缝均为5.0nm，在200~600nm波长范围内测定标准酸性红 27溶液（或样品溶液）的荧光发射光谱。分析所得荧光光谱图425nm波长处所对应的荧光强度。

3、吸收曲线的扫描

准确移取1.0×10³mg/L酸性红 27标准溶液0.1mL于10mL比色管中，二次蒸馏水稀释至刻度定容，摇匀，配制成10mg/L的酸性红 27溶液，移至1mL比色皿中，于TU-1901双光束紫外可见分光光度计上，扫描200～700nm波长范围的该酸性红 27溶液的吸收谱图。

4、最佳激发波长的扫描

准确移取1.0×10³mg/L的酸性红 27标准溶液0.05mL于10mL比色管中，用二次蒸馏水稀释至刻度定容，摇匀，配制成浓度为5mg/L的标准溶液。在按2所述方法测得的激发波长，对酸性红 27溶液于400~500nm波长范围内进行荧光光谱的扫描。

5、最佳发射波长的扫描

分别移取1.0×10³mg/L的酸性红 27标准溶液0.10、0.15、0.20、0.30mL于10mL比色管中，用二次蒸馏水稀释至刻度定容，摇匀，配制成浓度分别为10、15、20、30mg/L的标准溶液。在按2所述方法测得的最佳激发波长下，扫描波长为370~500nm范围内酸性红 27溶液的荧光光谱。

6、工作曲线的测定

分别移取1.0×103mg/L的酸性红 27标准溶液0.02、0.03、0.05、0.06、0.09、0.10、0.12、0.14mL于10mL比色管中，加二次蒸馏水定容至刻度，摇匀，配制成浓度分别为2.0、3.0、5.0、6.0、9.0、10.0、12.0、14.0mg/L的标准溶液，均置于1cm石英比色皿中，设置激发波长和发射波长分别为320nm和425nm、荧光分光光度计的激发狭缝宽度和发射狭缝宽度均为5.0nm，在该条件下进行荧光光谱扫描，测定不同浓度酸性红 27溶液的荧光强度。

7、样品溶液的测定

准确称取样品75.8950g，水浴加热，脱气，用NaOH溶液调pH值为7左右，转移至500mL容量瓶中用二次蒸馏水定容，摇匀，配成样品溶液。分别准确移取1.00mL样品溶液1于6支洁净的10mL比色管中，并用二次蒸馏水稀释至刻度，摇匀，待用。将样品溶液分别置于1cm石英比色皿中，设置荧光分光光度计的激发狭缝宽度和发射狭缝宽度均为5.0nm、激发波长为320nm、发射波长为425nm进行光谱扫描，测定样品溶液荧光强度，利用线性曲线计算出酸性红 27的含量。

参考文献

[1]张彦青. 荧光光谱法测定食品中的苋菜红含量[J]. 山东化工,2017,46(7):124-126. DOI:10.3969/j.issn.1008-021X.2017.07.044.