黄豆黄苷的制备

背景及概述^[1]

黄豆黄苷是大豆异黄酮的一种糖苷型化合物，在大豆胚芽中含量较高，约占异黄酮总量的40％。大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物，是一类具有生物活性的黄酮类化合物。大豆异黄酮具有与雌激素相似的结构，又被称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性等，是植物来源的天然抗癌及预防癌症因子。

制备^[1]

我国大豆资源丰富，种植面积广泛，因此大豆及其副产物的研制开发具有很大的发展潜力。资料显示，大豆收获后的大豆茎叶在我国的利用率较低，一部分被用作饲料原料，尚不到总产量的30％，大部分被废弃在田间地头，既造成了资源浪费，又导致环境被污染。因此，对大豆叶进行合理利用进而创造价值，具有深远的社会意义。大豆籽实中大豆异黄酮的提取工艺研究已有大量报道，但是大豆叶中大豆异黄酮的提取尤其是单一化合物的提取纯化及其功效研究罕见报道。

CN201810756493.X提供了从大豆叶提取纯化黄豆黄苷的方法，大豆叶黄豆黄苷具有良好的降血脂、降血糖功效。为解决以上技术问题，本发明通过以下技术方案实现：大豆叶黄豆黄苷的提取纯 化方法是按以下步骤进行的：

步骤(1)、将干燥的大豆叶粉碎，过筛，加入10倍重量的去离子水，浸泡至少24h；

步骤(2)、然后超声提取至少20min，再加热萃取，离心除去固形物，获得上清液；

步骤(3)、步骤(2)获取的上清液用石油醚和去离子水进行分液萃取，萃取后水层 再次用乙酸乙酯分液萃取，得乙酸乙酯提取物；

步骤(4)、乙酸乙酯提取物经硅胶色谱分离纯化，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，经硅胶薄层色谱检测后合并，经高效液相色谱检测，即得。

制备举例：

步骤(1)将干燥大豆叶粉碎，过60目筛，加入10倍重量的去离子水，浸泡24h；

步骤(2)置于功率100W的超声波条件下提取20min，再置于60℃条件下萃取1h，以 1000rpm的速率离心除去固形物，获得上清液；

步骤(3)将步骤(2)获得的上清液以石油醚和去离子水(石油醚和去离子水的体积 比为1:1)进行分液萃取，萃取后水层再次与乙酸乙酯以体积比1:1分液萃取，得乙酸乙酯提取物；

步骤(4)将步骤(3)获得的乙酸乙酯提取物经硅胶色谱分离纯化，以石油醚-乙酸 乙酯(体积比4:1→3:1→2:1→1:1)进行梯度洗脱，洗脱物多次经硅胶薄层色谱检测后合并 相同样点接受液，经高效液相色谱比对确认所获得化合物为黄豆黄苷；

其中，步骤(4)高效液相色谱检测条件如下：

色谱柱：Develosil C-30-UG-5(4.6i.d.*250mm,野村化学株式会社,日本)，A溶媒 15％乙腈。所得黄豆黄苷高效液相色谱图如图1。

药理作用^[1]

研究证实黄豆黄苷有多种生物活性作用，其具有一定的降血脂、降血糖功效。黄豆黄苷也具有抗菌，抗病毒作用，补充雌激素作用，可预防骨质疏松症，防止心脑血管疾病，预防癌症和减少肿瘤数目。减轻或避免因雌激素减少引起的更年期综合症，以及具有抗衰老和防止酒精中毒等功效。

主要参考资料

[1] CN201810756493.X 大豆叶黄豆黄苷的提取纯化方法及其用途