毛癣菌通用PCR试剂盒的应用

背景^[1-3]

毛癣菌通用PCR试剂盒是一种用于检测毛癣菌的生物试剂盒，通过聚合酶链式反应（PCR）技术对样本进行检测。以下是该试剂盒的基本信息：

组成：毛癣菌通用PCR试剂盒通常包括PCR反应液、酶标板、标准品等组成部分。

特点：该试剂盒具有高特异性、高灵敏度、快速检测等特点。通过对毛癣菌基因组特定片段进行扩增，可以有效区分不同种类的毛癣菌，且检测限可达到10ng/ml左右的人基因组DNA。此外，试剂盒还采用了酶标板等优质材料，确保了检测的准确性和可靠性。

用途：毛癣菌通用PCR试剂盒适用于对各类样本进行毛癣菌检测，如头皮屑、皮肤等。该试剂盒可广泛应用于医学、生物学等领域，为皮肤科医生、研究人员等提供有力的检测工具。

使用方法：使用毛癣菌通用PCR试剂盒时，需要按照说明书的步骤进行操作。通常包括样本处理、PCR扩增、酶标板检测等环节。操作简便，一般人员经过培训即可熟练掌握。

毛癣菌通用PCR试剂盒

毛癣菌通用PCR试剂盒的操作步骤如下：

1.样本采集：从患者体内采集血液、粪便、组织等样本，并将其保存在无菌容器中。

2.DNA提取：将采集到的样本进行DNA提取，通常采用柱式或磁珠式DNA提取试剂盒。提取后的DNA应保存在-20°C或更低的温度下。

3.PCR反应体系准备：根据毛癣菌通用PCR试剂盒说明书的要求，配制PCR反应体系，包括引物、荧光探针、dNTPs、DNA聚合酶等。

4.PCR反应：将提取的DNA加入到PCR反应体系中，进行PCR反应。反应条件和时间根据试剂盒说明书的要求进行设置。

5.结果分析：将PCR反应后的产物进行荧光信号检测，根据荧光信号的出现情况判断是否存在毛癣菌的感染。

应用^[4-5]

毛癣菌通用PCR试剂盒可以用于红色毛癣菌鉴定和种内分型

红色毛癣菌是(Trichophyton rubrum)是皮肤癣菌病最常见的致病真菌，常引起皮肤、毛发和指趾甲感染。据统计可导致皮肤癣菌病中90％的慢性难治性感染。在临床和流行病学研究上，不仅快速、准确的菌种鉴定非常必要，而且确定复发和再感染有时更为必要，但目前依然缺乏特别简单而准确的手段。所以有必要建立一种快速准确而简单的菌种鉴定和种内分型的方法。

目的：1．以改良KANE／PISCHER皮肤癣菌鉴定系统对皮肤癣菌进行培养鉴定，建立一种适宜的皮肤癣菌标准化鉴定系统。2．建立一种快速、简单、重复性强的红色毛癣菌种内分型方法。材料和方法：1．用改良KANE／FISCHER皮肤癣菌鉴定系统对福建沿海某部队采取的69株皮肤癣菌和北京大学第一医院真菌中心保藏的皮肤癣菌ATCC株和临床株13株进行培养鉴定。2．对其中的63株红色毛癣菌用毛癣菌通用PCR试剂盒扩增其核糖体非转录间隔区(NTS)的两个串联重复亚单位TRS-1和TRS-2区，进行种内分型。

毛癣菌通用PCR试剂盒结果：1．改良KANE／FISCHER鉴定系统基本可以快速、准确、可靠鉴定红色毛癣菌到种的水平。2．利用TRS-1和TRS-2区PCR产物的特征性带型，可将63株红色毛癣菌分为8型。

结论：1．改良KANE／FISCHER鉴定系统对常见的皮肤癣菌能达到种的鉴定，可作为标准化鉴定方法。对红色毛癣菌和须癣毛癣菌的鉴定较传统的鉴定方法更准确、更迅速。2．毛癣菌通用PCR试剂盒PCR方法产生的特征性的指纹图提供了一种快速、稳定、简便的分子生物学种内分型方法，可应用于红色毛癣菌感染的流行病学研究。

参考文献

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[2]A survey of dermatophytes isolated from human patients in the United States from 1982 to 1984[J].James T.Sinski;;Lee M.Kelley.Mycopathologia,1987(1)

[3]A yeast with linear molecules of mitochondrial DNA[J]..MGG Molecular&General Genetics,1984(3)

[4]The influence of sodium chloride on the growth and production of macroconidia of Trichophyton mentagrophytes[J].Julius Kane;;J.B.Fischer..1973

[5]樊建峰.红色毛癣菌鉴定和种内分型[D].中国人民解放军军医进修学院,2003.