细胞生物学功能鉴定服务的介绍

背景及概述^[1]

细胞生物学功能鉴定服务主要包括细胞的形态特征、细胞增长情况、细胞增殖能力、细胞凋亡情况、细胞迁移、细胞毒性测试、染色等项目。其中细胞生物学功能鉴定服务中细胞迁移项目是指检测细胞在接收到内源或外源迁移信号后而产生的移动。细胞迁移是通过胞体形变进行的缓慢的定向移动，涉及细胞觅食、伤口痊愈、胚胎发生、免疫反应、感染和癌症转移等生理现象。细胞生物学功能鉴定服务中举例如下：细胞毒性试验的方式，为将大肠癌细胞株放置于一96孔培养盘(10，000cells/well)内200μL的完全培养基中，1天后，再将培养基置换成含所测试物质0.25-1.0mg/mL的完全培养基，并加入到96孔培养盘的不同孔中。另外，对照组则只加入200μL的完全培养基，培养2天之后，以四甲基偶氮唑比色法分析测定每孔中的活细胞数量比值，并以免疫酵素分析仪在570nm下测定吸光值(opticaldensity)。

细胞生物学功能鉴定服务中细胞形态变化分析的方式举例如下：为将大肠癌细胞株放置于一培养盘(皮氏培养皿(petridish))，1天后待细胞贴底，给予适量含有所测试物质(1.0mg/mL)的药物浓度，置于培养盘中预定时间(2、7、14、21或28天)后，以倒立显微镜观察细胞形态，并拍照记录。细胞生物学功能鉴定服务中细胞周期与细胞凋亡检测的方式举例如下：为将大肠癌细胞株经所测试物质(1.0mg/mL)处理后，以胰蛋白-乙二胺四乙酸(trypsin-EDTA)处理细胞，与培养液一起收集，离心后去掉上清液，并以磷酸盐缓冲溶液清洗后，加入1mL冰冷的70％酒精，放入4℃冰箱过夜，以固定细胞。离心后，续以1mL磷酸盐缓冲溶液悬浮，加入50mg/mL的碘化丙锭(propidiumiodide)避光作用10分钟，以532nm波长激发后，在590±40nm波长侦测细胞荧光含量，以流式细胞仪进行分析。细胞生物学功能鉴定服务中细胞爬行转移分析的方式举例如下：

为将大肠癌细胞株放置于一6孔培养盘(cultureplate)(800，000cells/well)内，培养于2mL的完全培养基，隔夜，先用200μL滴管尖头(pippetttip)画出一条直线，再将培养基置换成含所测试物质(0.25-1.0mg/mL)的完全培养基加到培养盘的不同孔中，并在100倍显微镜下拍照记录Day0的直线宽度。另外，对照组则只置换成2mL的完全培养基、无其他添加物，将该培养盘静置24小时，并拍照记录Day1直线宽度密合的程度，最后以一量测软件(ImageJ软件)测量每张图上任意5点的宽度变化，每个条件可得至少25个测量数据，相比Day0与Day1的平均数据，即可计算出细胞爬行比率。

主要参考资料

[1] CN201310196516.3一种胎盘源母体间充质干细胞的制备方法