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尤氏泰勒虫PCR试剂盒的应用

发布日期:2024/1/16 8:54:27

背景[1-3]

尤氏泰勒虫PCR试剂盒是一种专门用于检测尤氏泰勒虫的分子生物学试剂盒。该试剂盒利用聚合酶链式反应(PCR)技术,能够快速、准确地检测出样本中是否存在尤氏泰勒虫的DNA。

尤氏泰勒虫PCR试剂盒是一种用于检测尤氏泰勒虫的分子生物学试剂盒。它包含了用于扩增和检测尤氏泰勒虫DNA的引物、Taq聚合酶、dNTPs等试剂,以及用于提取样品DNA的缓冲液和洗涤液等辅助试剂。

使用该试剂盒进行实验时,首先需要从待检测样品中提取出DNA,然后按照说明书中的步骤进行PCR扩增和检测。如果样品中存在尤氏泰勒虫的DNA,则可以通过电泳等方法观察到相应的扩增产物。

尤氏泰勒虫PCR试剂盒中包含了一系列的引物和探针,这些引物和探针经过精心设计,能够特异性地与尤氏泰勒虫的DNA序列结合,从而实现对目标DNA的扩增和检测。通过PCR技术,可以在短时间内将目标DNA扩增至上千倍,从而大大提高了检测的灵敏度和特异性。

尤氏泰勒虫PCR试剂盒通常适用于科研和诊断领域,可以用于检测动物样品中尤氏泰勒虫的感染情况。该试剂盒具有快速、准确、灵敏度高等优点,能够为科研人员和诊断医生提供可靠的检测结果。

尤氏泰勒虫PCR试剂盒.png

尤氏泰勒虫PCR试剂盒

尤氏泰勒虫PCR试剂盒的操作步骤如下:

1.样本采集:从患者体内采集血液、粪便、组织等样本,并将其保存在无菌容器中。

2.DNA提取:将采集到的样本进行DNA提取,通常采用柱式或磁珠式DNA提取试剂盒。提取后的DNA应保存在-20°C或更低的温度下。

3.PCR反应体系准备:根据尤氏泰勒虫PCR试剂盒的要求,配制PCR反应体系,包括引物、荧光探针、dNTPs、DNA聚合酶等。

4.PCR反应:将提取的DNA加入到PCR反应体系中,进行PCR反应。反应条件和时间根据试剂盒说明书的要求进行设置。

5.结果分析:将PCR反应后的产物进行荧光信号检测,根据荧光信号的出现情况判断是否存在尤氏泰勒虫的感染。

应用[4-5]

尤氏泰勒虫PCR试剂盒可以用于青海血蜱体内牛羊梨形虫PCR检测技术的建立和应用

青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)是我国命名的蜱种,研究表明它是羊的尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、羊巴贝斯虫和牛的中华泰勒虫等四种梨形虫病的传播媒介,这些病原都直接危害着我国畜牧业的发展。传统的病原检测方法主要以显微镜镜检查为主,这既费时又不敏感,且很难区分四种病原。

本实验以四种梨形虫的18S rRNA基因序列为依据,利用该基因在生物进化过程中形成的保守性区域和不同虫种间的高变区域,分别设计了梨形虫的通用引物和针对不同虫种的种特异引物,建立了尤氏泰勒虫PCR试剂盒套式PCR方法,并运用所建立的方法对青海血蜱体内梨形虫的感染状况进行了检测。

尤氏泰勒虫PCR试剂盒结果表明:该方法对尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、中华泰勒虫和羊巴贝斯虫基因组DNA的敏感性分别是0.1pg、1ng、10pg和100pg。通过对采自甘肃省甘南藏族自治州临潭县的136份青海血蜱样品(其中雌蜱55份,雄蜱81份)进行检测,其中感染蜱62份,感染率为45.59%;混合感染蜱12份,混合感染率为19.35%。尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫和牛中华泰勒虫三种病原混合感染的有2份;羊巴贝斯虫和尤氏泰勒虫两种病原混合感染的有1份;尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫两种病原混合感染的有9份。感染的雌蜱27份,占检查雌蜱总数的49.1%,感染的雄蜱35份,占检查雄蜱总数的43.2%。带有尤氏泰勒虫的蜱62份,感染率为45.59%,吕氏泰勒虫感染9份,感染率为6.62%,中华泰勒虫感染2份,感染率为1.47%,2份均为雌蜱;羊巴贝斯虫感染1份为雄蜱,感染率为0.74%。尤氏泰勒虫PCR试剂盒检测发现尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫的混合感染占90%。说明该地区的羊主要受到尤氏和吕氏泰勒虫的混合感染,这与以往的流行病学调查结果一致。

参考文献

[1]Phylogenetic analysis of Theileria species transmitted by Haemaphysalis qinghaiensis[J].Hong Yin;;Jianxun Luo;;Leonhard Schnittger;;Bingyi Lu;;Doreen Beyer;;Miling Ma;;Guiquan Guan;;Qi Bai;;Chengping Lu;;Jabbar Ahmed.Parasitology Research,2004(1)

[2]Observation on the schizont stage of an unidentified Theileria sp.in experimentally infected sheep[J].Hong Yin;;Guangyuan Liu;;Jianxun Luo;;Guiquan Guan;;Miling Ma;;Jabbar Ahmed;;Qi Bai.Parasitology Research,2003(1)

[3]Experiments on transmission of an unidentified Theileria sp.to small ruminants with Haemaphysalis qinghaiensis and Hyalomma anatolicum anatolicum[J].Hong Yin;;Jianxun Luo;;Guiquan Guan;;Bingyi Lu;;Miling Ma;;Qicai Zhang;;Wenshun Lu;;Chengping Lu;;Jabbar Ahmed.Veterinary Parasitology,2002(1)

[4]Haemaphysalis qinghaiensis ticks transmit at least two different Theileria species:one is infective to yaks,one is infective to sheep[J].Hong Yin;;Guiquan Guan;;Miling Ma;;Jianxun Luo;;Bingyi Lu;;Gailing Yuan;;Qi Bai;;Chenping Lu;;Zhengpu Yuan;;Patricia Preston.Veterinary Parasitology,2002(1)

[5]孙彩琴.青海血蜱体内牛羊梨形虫PCR检测技术的建立和应用[D].甘肃农业大学,2008.

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