常规兔源多克隆抗体制备的介绍

背景及概述^[1]

当机体受到抗原刺激后，可产生抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇，各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此，由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物。一分子蛋白质激素的表面存在多个不同的抗原决定簇，可同B淋巴细胞表面的相应受体结合。一个B淋巴细胞表面只能和一个抗原决定簇结合。一个静止的B细胞与抗原决定簇结合后即被活化并增殖和分化为一群合成和分泌抗相应抗原决定簇抗体的浆细胞，这一群细胞称为一个克隆。用经典动物免疫法得到的抗血清中含有多种由不同克隆产生的、抗不同抗原决定簇的抗体，称为PCAb。自身免疫性内分泌疾病患者血清中存在的抗某一自身抗原例如甲状腺过氧化物酶等的抗体，也可具有多克隆性质，也可称为多克隆抗体。

可利用间接还原胺化法制备亲和层析柱，并优化反应条件。运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原，制备兔源多克隆抗体，也包括常规兔源多克隆抗体制备。常规兔源多克隆抗体制备包括以下几步：多肽设计与合成、原核蛋白制备（包括c     DNA合成、载体构、蛋白表达与纯化等）、免疫阶段（包括ELISA检测等）、纯化与检测（包括亲和纯化及特异性亲和纯化等）。

主要参考资料

[1]中华医学百科大辞海

[2]现代药学名词手册

[3]自制肝素亲和柱分离纯化载脂蛋白H及其抗体制备与鉴