PC-14 人肺腺癌细胞系的应用

背景^[1-3]

PC-14人肺腺癌细胞系是一种来源于人肺腺癌的细胞系。它是一种常用的实验材料，被广泛用于研究肿瘤生物学、药物筛选和治疗策略等领域。

PC-14人肺腺癌细胞系具有以下特点：

高度增殖：PC-14人肺腺癌细胞系具有快速增殖的能力，可以在体外培养条件下快速生长。

多药耐药性：PC-14人肺腺癌细胞系对多种化疗药物表现出耐药性，这使得它成为研究肿瘤耐药机制的重要模型。

可移植性：PC-14人肺腺癌细胞系可以通过移植到小鼠体内来研究肿瘤的生长和转移情况。

PC-14人肺腺癌细胞系可以通过多种方法进行培养和扩增，包括贴壁培养、悬浮培养和三维培养等。此外，它还可以被用于制备肿瘤疫苗、基因治疗和药物筛选等实验。PC-14人肺腺癌细胞系是一种来源于人类肺腺癌的细胞系，通常用于研究肺癌的生物学特性和治疗机制。该细胞系具有特定的形态和生物学特性，如细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等，可以用于研究肺癌的发生、发展和治疗等方面的研究。

PC-14人肺腺癌细胞系

PC-14人肺腺癌细胞系细胞培养操作:

1)复苏PC-14人肺腺癌细胞系细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)PC-14人肺腺癌细胞系细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)PC-14人肺腺癌细胞系细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

应用^[4-5]

PC-14人肺腺癌细胞系可以用于CUGBP1表达对肺癌转移、增殖的影响

初步探讨CUGBP1表达对肺癌增殖、转移的影响。

方法：将PC-14人肺腺癌细胞系作为实验对象,运用传代培养消化法进行培养,构建慢病毒CUGBP1-sh RNA、CUGBP1-c DNA为表达载体。分别利用上述c DNA和sh RNA慢病毒转染PC-14人肺腺癌细胞系,将CUGBP1作为控制变量,上调及下调其表达。用RT-PCR及western blot方法,取对数生长期的细胞,检测不同细胞系中CUGBP1的不同表达。通过划痕实验、细胞侵袭实验(基底膜侵袭实验)、粘附实验、Transwell等方法,研究不同因子相互调节对于肺癌转移、增殖功能的影响。由细胞学层面上初对步探索CUGBP1表达同肺癌细胞生物学特性的相关性。结果肺癌患者CUGBP1mRNA和蛋白过表达与转移、增殖相关,是肺癌患者预后的独立预测因子,CUGBP1的作用是一个多基因协同作用的复杂现象。结论CUGBP1过表达导致肺癌转移、增殖能力增强,其参与了肺癌细胞的生物学反应。

参考文献

[1]TLR4 signaling pathway in mouse Lewis lung cancer cells promotes the expression of TGF-β1 and IL-10 and tumor cells migration[J].Feng Liu;;Ali Goodarzi;;Haifeng Wang;;Joanna Stasiak;;Jianbo Sun;;Yu Zhou;;Chun Li;;Haixia Li;;Kun Jiang;;Jing Li;;Xiaodong Gai.Bio-Medical Materials and Engineering,2014(1)

[2]Surgery decreases number of cells secreting cytotoxic mediators and increases secretion of interleukin 10 in patients with lung cancer[J].P.Rybojad;;A.Jabłonka;;B.Wilczyńska;;J.Tabarkiewicz.European Journal of Surgical Oncology,2013

[3]CUG-binding protein 1(CUGBP1)expression and prognosis of non-small cell lung cancer[J].W.Jiao;;J.Zhao;;M.Wang;;Y.Wang;;Y.Luo;;Y.Zhao;;D.Tang;;Y.Shen.Clinical and Translational Oncology,2013(10)

[4]The activation of HMGB1 as a progression factor on inflammation response in normal human bronchial epithelial cells through RAGE/JNK/NF-κB pathway[J].Xiaojin Wu;;Yanyan Mi;;Hui Yang;;Ankang Hu;;Qingguo Zhang;;Chunli Shang.Molecular and Cellular Biochemistry,2013(1)

[5]张进.CUGBP1表达对肺癌转移、增殖的影响[D].青岛大学,2018.