从长春花中提取纯化长春碱

长春花是夹竹桃科长春花属一种重要的药用植物，其中含有几十种吲哚类生物碱，长春碱是其中的一种，具有抗癌的作用，为临床上广泛应用的抗肿瘤药物，具有很高的药用价值，国内外对其提取分离的研究由来已久。但是由于长春花中含有几十种生物碱，长春碱含量很低，仅为万分之几，提取并初步成盐后的硫酸长春碱粗品含量仅60%左右，无法满足使用要求，需要对其进一步纯化。

目前报道的长春碱的提取方法有溶剂提取法、超临界萃取法、超声波提取法等，分离方法有TLC法、柱色谱法、高效逆流色谱法等。这些方法各有自己的优势和缺点，如果能对这些方法进行改进和结合，提高长春碱的提取率和纯度，将会更有利于其工业化应用。

专利 CN104262362B 公开了一种长春碱的提取及纯化方法，步骤如下：

（1）取长春花，用15-25wt%的氯化钠水溶液超声浸泡15min，然后取出直接放入流速为5-8m/s的-20℃的冷空气中冷冻干燥20min，冷冻干燥后将长春花粉碎。

（2）将步骤（1）的长春花加入30%体积分数的乙醇中，用柠檬酸调节pH为1.5，回流提取，过滤取滤液，将滤液用氢氧化钠调整pH为8-9，然后以喷雾的形式从萃取罐顶部喷入，同时将萃取剂以喷雾的形式从萃取罐的底部喷入，喷入完毕萃取收集有机相；所述萃取剂为体积比为10:1-2.5的三氯乙烯和己烷的混合物；

（3）有机相减压除去溶剂，固体用乙醇完全溶解，加浓度5wt%的硫酸的乙醇溶液调节pH为3.8，离心、干燥得硫酸长春碱粗品；

（4）将硫酸长春碱粗品用水溶解，加饱和碳酸氢钠溶液调节pH为8-9，加入二氯甲烷萃取，二氯甲烷有机相用水洗涤直至洗涤后的水相透明无色，收集水洗后的有机相，减压蒸馏除去二氯甲烷，所得剩余物上硅胶柱，用体积比为90：10～98：2的二氯甲烷与甲醇氨饱和溶液的混合物作为流动相进行洗脱，收集无色馏分，将馏分减压蒸馏至干，所得固体加入体积比为9：0.3-0.8：1-3的甲醇、石油醚和乙酸乙酯的混合液中，常温超声5min，然后在-10℃低温静置24h，所得晶体在-10℃低温抽滤，-10℃冻干，得长春碱纯品。

此方法步骤简洁、耗用时间少，先对长春花进行预处理再进行提取，不仅可以除掉长春花部分溶于水的色素杂质，而且可以使长春花细胞壁破碎，更利于下步产品的溶出。通过对提取步骤和条件的选择，提高了硫酸长春碱粗品的得率和含量，通过对各提取试剂、萃取试剂、洗脱试剂和结晶试剂的选择，提高了长春碱的收率和纯度，通过一次结晶即可得到长春碱纯品，简化了纯化过程，更为快速的实现了长春碱的分离和纯化，且最终得到的产品纯度高，更为满足临床需求。