阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒的应用

背景^[1-3]

阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒是一种专门用于检测阿尔莱特葡萄球菌的荧光定量PCR试剂盒。该试剂盒具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点，可对感染性疾病进行诊断。其原理是在PCR体系中加入荧光化合物(荧光染料或荧光探针)，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，使每个循环变得“可见”。本产品以探针法荧光定量RT-PCR技术为基础，以阿尔莱特葡萄球菌为检测对象，是专门用于快速、准确检测该病原体的试剂盒。

阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒是一种用于检测阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus albertii)的分子生物学工具。这种试剂盒通常包含PCR反应所需的所有成分，如引物、dNTPs、缓冲液、酶等。

PCR(聚合酶链反应)是一种分子生物学技术，用于扩增特定的DNA片段。在阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒中，引物是特异性地识别并结合到阿尔莱特葡萄球菌DNA上的短链DNA序列。当这些引物与目标DNA结合时，它们会触发DNA聚合酶的活性，从而使目标DNA片段得以扩增。

阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒通常用于实验室研究和诊断，例如在检测和鉴定感染性疾病、研究病原体传播途径以及开发新的治疗方法等方面。然而，需要注意的是，这种试剂盒的使用需要遵循严格的实验操作规程，以确保结果的准确性和可靠性。

阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒

阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒的操作步骤如下：

1.样本采集：从患者体内采集血液、粪便、组织等样本，并将其保存在无菌容器中。

2.DNA提取：将采集到的样本进行DNA提取，通常采用柱式或磁珠式DNA提取试剂盒。提取后的DNA应保存在-20°C或更低的温度下。

3.PCR反应体系准备：根据试剂盒说明书的要求，配制PCR反应体系，包括引物、荧光探针、dNTPs、DNA聚合酶等。

4.PCR反应：将提取的DNA加入到PCR反应体系中，进行PCR反应。反应条件和时间根据试剂盒说明书的要求进行设置。

5.结果分析：将PCR反应后的产物进行荧光信号检测，根据荧光信号的出现情况判断是否存在阿尔莱特葡萄球菌的感染。

应用^[4-5]

阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒可以用于应用16S rRNA基因序列分析技术鉴定临床非典型细菌

将16S rRNA基因序列分析技术应用于微生物实验室传统方法鉴定可靠率低或无法鉴定的15株实验细菌，作为细菌常规鉴定手段的必要补充。

方法：选择我院临床微生物实验室保存的5株标准菌株验证实验方法的准确性后，收集实验室常规方法不能准确鉴定的实验细菌15株(涵盖革兰阳性球菌，革兰阳性杆菌及革兰阴性杆菌)，提取DNA模板，使用阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段，扩增产物由华大基因测序公司测序，将16S rRNA基因序列与GENBANK数据库中16S rRNA序列进行同源比对分析后，把16S rRNA序列同源性在95%99%之间定义为同属细菌，大于等于99%则定义为同种细菌。结果：在15株实验细菌中，有14株菌(93.3%)的16S rRNA基因序列与GENBANK数据库16S rRNA序列同源性达99%以上，成功鉴定到种的水平，包括鼻疽诺卡菌，大肠埃希菌，阿尔莱特葡萄球菌，脆弱拟杆菌，弗氏柠檬酸杆菌，短小芽孢杆菌，河流漫游球菌，极小短小杆菌，伴放线凝聚杆菌，毗邻颗粒球菌；1株菌(6.6%)的16S rRNA序列同源性为97%，鉴定到属的水平，归属于短状杆菌属。

结论：对于微生物实验室利用传统方法无法准确鉴定的细菌，利用阿尔莱特葡萄球菌PCR试剂盒16S rRNA基因序列分析技术鉴定具有准确、快速及简便的特点，可适用于临床非典型菌、少见菌以及新型细菌的鉴定。

参考文献

[1]Phenotypic and genotypic features of Aggregatibacter actinomycetemcomitans isolated from patients with periodontal disease[J].Thais C.Wahasugui;;Viviane Nakano;;Roxane M.F.Piazza;;Mario J.Avila-Campos.Diagnostic Microbiology&Infectious Disease,2013

[2]Microbial phylogeny and diversity:Small subunit ribosomal RNA sequence analysis and beyond[J].J.Rajendhran;;P.Gunasekaran.Microbiological Research,2010(2)

[3]Conventional and molecular techniques for the early diagnosis of bacteraemia[J].Michela Paolucci;;Maria Paola Landini;;Vittorio Sambri.International Journal of Antimicrobial Agents,2010

[4]Molecular approaches for identification and characterization of lactic acid bacteria[J].DheerajMOHANIA;RavinderNAGPAL;ManojKUMAR;AartiBHARDWAJ;MukeshYADAV;ShaliniJAIN;FrancescoMAROTTA;VinodSINGH;OmPARKASH;HariomYADAV.Journal of Digestive Diseases,2008(4)

[5]王艳萍.应用16S rRNA基因序列分析技术鉴定临床非典型细菌[D].重庆医科大学,2014.