蟛蜞菊内酯治疗肺损伤的研究进展

蟛蜞菊内酯(Wedelolactone, WED)为香豆草醚类，具有多种生物活性，在药用植物墨旱莲(Eclipta prostrata L.)、金盏蟛蜞菊(Wedelia calenulacea)、小连翘(Hypericum erectum)中均含有。蟛蜞菊属植物在亚洲和南美等地区常用来治疗脓毒性休克，肝脏疾病，病毒感染和毒蛇咬伤。蟛蜞菊内酯可能是蟛蜞菊和墨旱莲中发挥保肝活性的主要化合物之一。本文将介绍蟛蜞菊内酯用于治疗肺损伤的研究进展。

背景

肺纤维化是一种以纤维化及肺实质重塑为特征的渐进性疾病，肺成纤维细胞过度增殖、转分化为肌成纤维母细胞，分泌大量胶原和基质沉积是其重要特征，目前尚无有效的治疗方法。

进展

专利 CN103816148B 经过体内、外药理实验结果证明，蟛蜞菊内酯可改善博来霉素诱导小鼠肺纤维化，通过HE、Masson染色观察肺组织切片、测定肺脏指数和肺组织中HYP、NO、MDA、TGF-β1等各种指标的变化情况，并采用MTT法检测蟛蜞菊内酯对TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞增殖的抑制作用，测定细胞中HYP含量变化，综合评价蟛蜞菊内酯的改善肺纤维化的药理作用。

Juan Zhang 等人^[1]研究了蟛蜞菊内酯在巨噬细胞介导的呼吸系统疾病，特别是急性肺损伤（ALI）中的保护机制和分子靶点。

为了发现蟛蜞菊内酯的直接细胞靶点，研究者使用环氧活化的琼脂糖珠结合WED进行了目标捕鱼实验。银染后，∼63kDa处出现明显的蛋白带，LC-MS/MS分析鉴定为sEH。接着用WB、免疫荧光共定位、IP、细胞热位移试验（CETSA）、药物亲和反应靶点稳定性（DARTS）和MST实验验证了WED与sEH的直接结合。sEH的C端具有水解酶活性，在AA代谢中起着关键作用。研究者发现蟛蜞菊内酯显著抑制了人和小鼠的sEH酶活性，并提高了lps诱导的巨噬细胞中sEH底物14，15-EET的水平，降低其二醇水平。

研究者接着敲除了sEH进行验证，发现sEH敲除逆转了蟛蜞菊内酯在lps刺激的巨噬细胞中的抗炎和抗氧化作用。为了探索WED在sEH上的结合位点，进行了分子动力学刺激，发现WED通过氨基酸残基Phe362和Gln384的两个氢键相互作用。作者将Phe362和Gln384突变，下拉实验、CETSA、DARTS显示突变废除了WED与she的结合。在lps刺激的RAW264.7细胞中，Phe362和Gln384突变也消除了WED的抗炎和抗氧化作用。

最后，研究者研究了蟛蜞菊内酯在体内抑制sEH和GSK3β的催化活性，并将sEH基因KO验证了WED的肺保护作用以及对脂多糖诱导的炎症和氧化应激的影响。

参考文献

[1] Macrophage Inactivation by Small Molecule Wedelolactone via Targeting sEH for the Treatment of LPS-Induced Acute Lung Injury. doi:10.1021/acscentsci.2c01424