纤维单胞菌通用PCR试剂盒的应用

背景^[1-3]

纤维单胞菌通用PCR试剂盒是一种专门为纤维单胞菌检测设计的PCR试剂盒，具有快速、简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。该试剂盒包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等成分，可以快速简便地进行PCR反应。使用时只需加入DNA模板和引物即可，操作简便快捷。

纤维单胞菌

纤维单胞菌通用PCR试剂盒适用于对感染疾病的诊断，理论上只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。该试剂盒具有高灵敏度和高特异性，可最大限度地减少人为误差。同时，纤维单胞菌通用PCR试剂盒还具有下列特点：

引物经过精心优化，专一性强，只扩增纤维单胞菌通用，与其他微生物没有交叉反应。

提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差。

使用时只需加入DNA模板和引物即可，操作简便快捷。

试剂盒包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等成分，可以快速简便地进行PCR反应。

纤维单胞菌通用PCR试剂盒是一种用于扩增和检测多种纤维单胞菌的PCR试剂盒。纤维单胞菌是一类革兰氏阴性的细菌，广泛存在于自然界中，包括土壤、水体、植物和动物体内。这些细菌可以引起多种疾病，如肺炎、败血症、尿路感染等。

纤维单胞菌通用PCR试剂盒通常包含引物、酶和其他试剂，用于从样本中扩增目标DNA序列。通过PCR检测，可以快速、准确地诊断纤维单胞菌感染，有助于及时采取控制措施，防止病毒传播。

应用^[4-5]

纤维单胞菌通用PCR试剂盒可以用于纤维单胞菌和纤维微细菌絮凝剂研发及在污水处理中的初步应用

从微生物絮凝剂产生菌的筛选和鉴定入手,使用纤维单胞菌通用PCR试剂盒分离出三株絮凝活性较好的絮凝剂产生菌,通过分子生物学和系统的生理生化鉴定,确定菌株P40-2为纤维单胞菌的一个新种,将其命名为金牛纤维单胞菌(Cellulomonas taurus);菌株P71-1和P99-1鉴定为纤维微细菌。实验确定微生物絮凝剂MBF-P40、MBF-P71、MBF-P99培养基碳氮源组合为葡萄糖、酵母提取物和尿素。最适培养条件的初始p H值为7,培养温度30-36℃,转数120-130 r/min,培养时间24-48h。

通过毒理学实验证实,MBF-P40、MBF-P71、MBF-P99的小鼠LD50分别为1.5×1011CFU/m L、0.75×1011CFU/m L、1.0×1011CFU/m L,并且观察经灌胃MBF-P系列产品后,小鼠的血细胞染色体并未发生畸变。通过Molish、双缩脲、茚三酮反应定性分析显示微生物絮凝剂组分以糖类和蛋白质为主,LC-MS定量分析MBF-P主要由八种单糖构成,其中MBF-P40以核糖为主,MBF-P71以葡萄糖和核糖为主,MBF-P99以鼠李糖、木糖、葡萄糖和核糖为主。LC-MS/MS定量分析MBF-P40鉴定到956个蛋白、MBF-P71鉴定到382个蛋白、MBF-P99鉴定到1420个蛋白。Zeta电位测定和红外光谱分析显示MBF-P系列产品带有负电荷,并且存在羟基、氨基、羧基、酰氧基等官能团代表的多糖特征峰,表明其絮凝机理主要为架桥和吸附、微生物分解代谢作用及电位中和作用。

在MBF-P系列产品实际处理污水废水应用中,发现对养殖场、生活污水处理厂和船舶港口附近污水净化效果较为理想使用纤维单胞菌通用PCR试剂盒分离确定菌株P40-2的含量,其中养猪场废水絮凝率最高达到96.07%,COD去除率最高89.72%;生活污水处理厂絮凝率达95.64%、COD去除率达50.37%、氨氮去除率达64.16%。MBF-P99处理船舶港口附近污水絮凝率高达93.76%、COD去除率达83.62%、氨氮去除率达93.86%、总氮去除率达92.33%。MBF-P40和MBF-P71产品保质期为6个月(4℃)、MBF-P99产品保质期为9个月(4℃)。污水处理效果SEM观察试验中发现添加MBF-P系列产品后,污水中的沉降物形成大片状、质地更加紧密的絮状体。通过污水处理前后水质检测报告对比和用户试用反馈评价,MBF-P系列产品具有一定的市场开发价值,可适于规模化生产和推广应用。

参考文献

[1]Isolation,Identification,and Selection of Bacteria With Proof-of-Concept for Bioaugmentation of Whitewater From Wood-Free Paper Mills.Verdel Nada;Rijavec Tomaž;Rybkin Iaroslav;Erzin Anja;VeliščekŽiga;Pintar Albin;Lapanje Aleš.Frontiers in Microbiology,2021

[2]Soluble microbial products from the white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium as the bioflocculant for municipal wastewater treatment.Li Ning-Jie;Lan Qi;Wu Jing-Hang;Liu Jie;Zhang Xue-Hong;Zhang Feng;Yu Han-Qing.Science of the Total Environment,2021

[3]Cellulosimicrobium fucosivorans sp.nov.,isolated from San Elijo Lagoon,contains a fucose metabolic pathway linked to carotenoid production..Aviles Fabiola A;Kyndt John A.Archives of microbiology,2021

[4]Recent advances and perspectives in efforts to reduce the production and application cost of microbial flocculants.Liu Cong;Sun Di;Liu Jiawen;Zhu Jingrong;Liu Weijie.Bioresources and Bioprocessing,2021

[5]章沙沙.纤维单胞菌和纤维微细菌絮凝剂研发及在污水处理中的初步应用[D].吉林大学,2023.

参考文献

[1]Isolation,Identification,and Selection of Bacteria With Proof-of-Concept for Bioaugmentation of Whitewater From Wood-Free Paper Mills.Verdel Nada;Rijavec Toma?;Rybkin Iaroslav;Erzin Anja;Veli??ek?iga;Pintar Albin;Lapanje Ale?.Frontiers in Microbiology,2021

[2]Soluble microbial products from the white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium as the bioflocculant for municipal wastewater treatment.Li Ning-Jie;Lan Qi;Wu Jing-Hang;Liu Jie;Zhang Xue-Hong;Zhang Feng;Yu Han-Qing.Science of the Total Environment,2021

[3]Cellulosimicrobium fucosivorans sp.nov.,isolated from San Elijo Lagoon,contains a fucose metabolic pathway linked to carotenoid production..Aviles Fabiola A;Kyndt John A.Archives of microbiology,2021

[4]Recent advances and perspectives in efforts to reduce the production and application cost of microbial flocculants.Liu Cong;Sun Di;Liu Jiawen;Zhu Jingrong;Liu Weijie.Bioresources and Bioprocessing,2021

[5]章沙沙.纤维单胞菌和纤维微细菌絮凝剂研发及在污水处理中的初步应用[D].吉林大学,2023.