小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT在感染与肿瘤小鼠模型研究中的应用

降钙素原（procalcitonin，PCT）是由116个氨基酸组成的降钙素前体肽，生理状态下主要由甲状腺滤泡旁C细胞合成并裂解为降钙素，正常个体血清含量极低，当机体受到细菌内毒素（LPS）等刺激时，几乎所有实质细胞均可被激活并释放PCT，其水平在感染后2~6h内显著升高，6~24h达到峰值，升高程度与感染严重程度及预后密切相关^[2]。动物实验是研究PCT生物学功能与诊断价值的重要平台，小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT基于双抗夹心法的特异性、pg/ml级灵敏度与简便的操作流程，成为小鼠血清及组织样本中PCT定量检测的主流工具，为感染、炎症与肿瘤研究中PCT指标的获取提供了稳定可靠的检测路径。

在创伤感染研究领域，以严重烫伤内毒素血症昆明小鼠为模型，动态观察血清PCT等指标的变化，结果显示烫伤治疗对照组小鼠血清PCT显著高于正常对照组，而sCD14治疗后明显降低，差异均有统计学意义^[1]，提示PCT能够灵敏反映严重内毒素血症小鼠的炎症程度，可用于药物干预效果的动态评价。在这一类研究中，小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT以较低的成本与较高的检测通量，为小鼠PCT水平的批量定量提供了可行的技术选择，尤其适合干预研究中多组别、多时间点的样本检测需求。

在急性肝衰竭（ALF）模型中，石春霞等以D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠ALF模型，采用ELISA法检测血清及肝脏、脾脏、小肠组织中的PCT水平，结果显示模型组小鼠各样本PCT均显著升高，ROC曲线分析中PCT诊断效能最高，AUC达0.941，cut-off值为35.2pg/ml，敏感度93.8%、特异性87.5%，均优于PTX3、HBP及IL-6、IL-1β、TNF-α等指标^[2]。该研究充分说明，小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT不仅能定量血清PCT，还可配合组织匀浆处理实现血清与多组织部位PCT的同步检测，为多指标联合诊断研究提供了完整的方法学支撑。

除感染与炎症外，PCT在肿瘤标志物研究中的应用同样值得关注。曾博和田兴德建立甲状腺髓样癌（MTC）荷瘤BALB/c小鼠模型，经HE染色与免疫组化确认肿瘤性质后，使用ELISA试剂盒检测血清PCT及降钙素（CT）含量，发现荷瘤鼠血清PCT显著高于免疫抑制对照组与空白对照组，且血清PCT与瘤质量呈显著正相关，与CT含量亦呈显著正相关，提示PCT可作为MTC的辅助肿瘤标志物^[3]。相较于半衰期仅4~12min的CT，PCT半衰期约20~24h、性质稳定、标本更易保存，而小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT恰好能满足荷瘤小鼠小体积采血（0.6~1.0ml）条件下低丰度PCT的灵敏定量，为肿瘤标志物相关性研究提供了稳定可靠的检测方案。

综合可以发现，小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT在科研应用中需关注若干方法学要点。其一，样本采集与保存，血清样本宜及时分离并于-80℃冻存备检，组织样本可按10%比例制备匀浆后离心取上清^[2]。其二，结果判读应建立标准曲线并参考试剂盒提供的正常参考范围，正常小鼠血清PCT通常在数十pg/ml水平^[3]，而感染或荷瘤模型可升高数倍至十余倍^[1,3]，应根据预期水平选择适当的样本稀释倍数，避免超出检测动态范围。其三，ELISA结果与电化学发光等方法学结果之间可能存在差异，跨方法比较时应留意单位与截断值的换算^[1,2]。遵循上述要点，可最大限度发挥小鼠降钙素原(PCT)ELISA KIT在模型评价、机制研究与标志物筛选中的检测效能。

参考文献

[1] 万玲, 胡晓潞, 张萍, 等. 静脉注射sCD14对严重烫伤内毒素血症小鼠血清C-反应蛋白和降钙素原以及血糖水平的影响[J]. 实验与检验医学, 2012, 30(6): 531-532.

[2] 石春霞, 陈倩, 王瑶, 等. 急性肝衰竭小鼠血清与组织中PTX3、HBP、PCT及IL-6、IL-1β、TNF-α的变化及诊断价值[J]. 医学研究杂志, 2020, 49(1): 28-33.

[3] 曾博, 田兴德. 降钙素原在甲状腺髓样癌荷瘤鼠血清中的含量及相关性研究[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2021, 35(1): 86-91.